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古細菌由来グループ2型シャペロニンの熱安定化の分子機構

古菌2族伴侣蛋白热稳定性的分子机制

基本信息

批准号：
17710192
负责人：
吉田尊雄
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Japan Agency for Marine-Earth Science and Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2005
资助国家：
日本
起止时间：
2005 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

超好熱性古細菌Thermococcus sp.strain KS-1のシャペロニンは、分子量約6万のαβの2種類のサブユニットから構成されている。これらのサブユニットは、約80%の高い相同性を有するが、αは、低温適応型、βは高温適応型という、サブユニット間で機能的な相違がある。しかしながら、高い相同性にも関わらずサブユニット間で熱安定性が異なる原因は不明である。本研究では、シャペロニンサブユニット間の熱安定性の相違の原因を調べ、シャペロニンの熱安定化の分子機構を調べる。X線立体構造解析からシャペロニンサブユニットは3つのドメイン(頂点、中間、赤道)から構成されており、都合の良いことにN末端からC末端の順に赤道、中間、頂点、中間、赤道ドメインと分かれている。本年度は、熱安定性に関与する部位を同定するために、頂点、中間、赤道ドメインを交換した変異体の熱安定性を解析した。その結果、赤道ドメインをβ型にした変異体は、α型にした変異体よりも熱処理によりオリゴマーからモノマーへ解離しにくく、熱安定性が高いことがわかった。赤道ドメインにおけるαとβのアミノ酸配列の違いはC末端の20残基である。そこでβサブユニットのC末端の22残基をαに変えた変異体を作成し、熱安定性を調べたところ、αサブユニット並の熱安定性を示した。このことから、シャペロニンのC末端の20残基は、シャペロニンの熱安定性に関与する部分であることがわかった。また、αとβの機能の違いを調べるために、ATPase阻害剤のフッ化ベリリウムのリフォールディングにおける効果を解析し、αとβとには、熱安定性以外にも、機能的な違いがあることを示した。

Thermococcus sp. strain KS-1 has a molecular weight of about 60,000 and two species of αβ. About 80% of the high and medium identity of the two types of materials are different. The reason for the difference in thermal stability is unknown. In this study, we investigated the mechanism of thermal stability in the process of heat transfer. X-ray stereoscopic structure analysis: This year, the thermal stability of the relevant parts is analyzed. As a result, the equatorial type is different, the alpha type is different, and the thermal stability is high. Equator: α, β, C terminal 20 residues The 22 residues at the C-terminal of the β-terminal were modified to form a variant, and the thermal stability of the α-terminal was demonstrated. The 20 residues at the C-terminus of the protein are related to the thermal stability of the protein. Analysis of the effect of ATPase inhibitor, α and β, thermal stability and functional deviation

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Comparative analysis of the protein folding activities of two chaperonin subunits of Thermococcus strain KS-1 : the effects of beryllium fluoride.

热球菌 KS-1 菌株两个伴侣蛋白亚基的蛋白质折叠活性的比较分析：氟化铍的影响。

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
Extremophiles 11
影响因子：
0
作者：
T.Yoshida;R.lizuka;K.Itami;T.Yasunaga;H.Sakuraba;T.Ohshima;M.Yohda;T.Maruyama
通讯作者：
T.Maruyama

Contribution of the C-terminal region to the thermostability of the archaeal group II chaperonin from Thermococcus sp. strain KS-1

DOI：
10.1007/s00792-006-0519-y
发表时间：
2006-05
期刊：
Extremophiles
影响因子：
2.9
作者：
Takao Yoshida;Taro Kanzaki;R. Iizuka;Toshihiro Komada;T. Zako;R. Suzuki;T. Maruyama;M. Yohda
通讯作者：
Takao Yoshida;Taro Kanzaki;R. Iizuka;Toshihiro Komada;T. Zako;R. Suzuki;T. Maruyama;M. Yohda

Localization of prefoldin interaction sites in the hyperthermophilic group II chaperonin and correlations between binding rate and protein transfer rate.

超嗜热 II 族伴侣蛋白中前折叠蛋白相互作用位点的定位以及结合率和蛋白质转移率之间的相关性。