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CCN1の心臓における機能解析と新しい虚血性心疾患治療法の開発

CCN1在心脏中的功能分析及缺血性心脏病治疗新方法的开发

基本信息

批准号：
18590770
负责人：
田中誠
金额：
$ 2.49万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18590770/
关键词：
心筋細胞再生分泌因子酸化ストレス

项目摘要

我々は胎生期の心臓に発現する分泌蛋白をクローニングする過程で、CCN1が胎生中期の心臓に特異的に発現することを見いだした。胎生後期以降、発現は減少するが、成体心臓においては虚血時に再発現することから、我々はCCN1が虚血時の心筋細胞の生存に関与するのではないかという仮説を立てた。そこで、ラット培養心筋細胞とバキュロウイルスにより作製したCCN1リコンビナント蛋白を用いてin vitroの系でCCN1の心筋保護作用を調べた。まず、結合実験を行ったところ、CCN1蛋白は心筋細胞に濃度依存的、飽和的に結合し、レンチウイルスに組み込んだRNAiによりβ1インテグリンをノックダウンしたところCCN1の結合が抑制されたことから、CCN1は心筋細胞にβ1インテグリンを介して結合することが示された。次に、心筋細胞に過酸化水素で酸化ストレスを加えたところ、RNAiで内因性のCCN1をノックダウンした細胞では細胞死が有意に増加し、CCN1蛋白を培地に加えた細胞あるいはレンチウイルスでCCN1を過剰発現した細胞では細胞死が有意に抑制され、CCN1が酸化ストレス下にある心筋細胞を保護する働きがあることが判明した。そこで、心筋細胞でCCN1の下流に存在するシグナルについて検討した。心筋細胞にCCN1蛋白を加えると、インテグリンの下流に存在するfocal adhesion kinaseのリン酸化が促進され、さらに下流にあるAkt、ERKのリン酸化が促進された。β1インテグリンをノックダウンするとCCN1による心筋保護作用が失われたことから、CCN1の心筋保護作用はβ1インテグリンを介したものであることがわかった。次に、AktとERKの阻害薬を加えたところ、CCN1の心筋保護作用はAktの阻害薬では完全に抑制され、ERKの阻害薬では部分的に抑制されたので、CCN1の心筋保護作用は主にAktの活性化によるものであることがわかった。以上の結果より、CCN1はβ1インテグリン-Aktを介して酸化ストレス下にある心筋細胞の生存を促進することが示された(Yoshida et al.in press)。現在、CCN1の心筋保護作用をin vivoで証明するために、ランゲンドルフ法による虚血再潅流モデルを用いて実験を行っている。予備実験では、CCN1リコンビナント蛋白をあらかじめ還流することにより、虚血再潅流時の心機能の立ち上がりが良くなるという良好なデータを得ている。また、ラット心筋梗塞モデルを用いて、CCN1を慢性期に投与する実験も進行中である。

CCN1 is a mid-fetal heart-specific protein secreted during fetal development. In the later stages of life, the decline and development of the adult heart are related to the survival of the cardiac muscle cells in the case of deficiency of blood. CCN1 is a protein that regulates the protective effect of CCN1 on cultured cardiac muscle cells. CCN1 protein binds in a concentration-dependent, saturating manner to the β 1 protein in the cardiac muscle cell. CCN1 protein binds in a saturating manner to the β 1 protein in the cardiac muscle cell. In addition, CCN1 protein was added to the culture medium, CCN1 protein was found to be inhibited intentionally, CCN1 protein was found to be inhibited intentionally, CCN1 protein was found to be inhibited intentionally, CCN1 protein was found to be inhibited intentionally, CCN1 protein was detected to be inhibited intentionally, CCN1 protein was detected to be inhibited intentionally, CCN1 protein was detected to be inhibited intentionally. In addition, CCN1 is present downstream of the cardiac muscle cells. CCN1 protein expression in cardiac muscle cells is promoted by the presence of focal adhesion kinase and Akt in the downstream. CCN 1 has a protective effect on the heart muscle. CCN1 has a cardioprotective effect on Akt, and a cardioprotective effect on Akt is partially inhibited. The above results show that CCN1 promotes the survival of cardiac muscle cells under acidification through β1-integrin-Akt (Yoshida et al.in press). Now, CCN1's cardioprotective effect has been demonstrated in vivo. In preparation, CCN1 is a good candidate for cardiac function when the blood is deficient. CCN1 is in progress during the chronic phase.

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Endothelin-1 activates Homer lalpha expression via mitogen-activated protein kinase in cardiac myocytes.

Endothelin-1 通过心肌细胞中丝裂原激活蛋白激酶激活 Homer lalpha 表达。

DOI：
发表时间：
2006
期刊：
Int J Mol Med 18
影响因子：
0
作者：
Minatoguchi;S.;Arai;M.;Suzuki;K.;Nishigaki;K.;Takemura;G.;Fujiwara;H;湊口信也;Kiyonori Togi;Takahiro Kawamoto
通讯作者：
Takahiro Kawamoto

Essential role of Hand2 in interventricular septum formation and trabeculation during cardiac development.

Hand2 在心脏发育过程中室间隔形成和小梁形成中的重要作用。