ヒト胎盤形成における糖転移酵素GnT-Vの機能と絨毛外栄養膜細胞浸潤機構の解明

阐明糖基转移酶 GnT-V 的功能和绒毛外滋养层细胞侵袭机制在人胎盘形成中的作用

基本信息

  • 批准号:
    18799005
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.98万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
  • 财政年份:
    2006
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2006 至 2007
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

GnT-V発現抑制絨毛外栄養膜細胞(EVT)モデルとして絨毛癌細胞株JarにsiRNAレトロウイルスベクターを遺伝子導入し、機能実験を行った。siGnT-V導入株ではmock株に比べて、MTS assayによる96時間までの増殖能に差は見られなかった。Migration assayおよびmatrigel invasion assayでは遊走細胞は2.1倍に、浸潤細胞は3.4倍に亢進した。GnT-V発現抑制による浸潤能促進機構を明らかにするために、zymographyによるmatrix metalloproteinase活性の変化を確認したが、MMP-2,MMP-9活性ともに変化は認めなかった。次に、細胞外基質への接着能を検討すると、ラミニン、フィブロネクチン、コラーゲンIおよびIVすべてにおいて接着能は亢進していた。絨毛細胞が浸潤能を持つEVTに分化するときには、膜表面に発現するインテグリンのサブタイプが基質の変化とともに変化し、浸潤に最も重要であるのはα5β1インテグンである。インテグリサブタイプの発現をフローサイトメトリーで確かめると、α1,α5,α6,β1インテグリンすべてに発現変化は認めなかった。しかし、α5β1インテグリンによる免疫沈降後にL_4-PHAを用いたレクチンブロットを行うと、α5β1インテグリンヘのβ1-6GlcNAc鎖付加レベルがGnT-V抑制株において明らかに抑制されていた。免疫沈降後に行ったα5、β1インテグリン抗体を用いたWesternblotでもそれぞれの蛋白発現レベルに変化は認めなかった。以上より、ヒトEVTにおいてはGnT-Vがα5β1インテグリンにβ1-6-G1cNAc鎖を付加することによって、浸潤を抑制している可能性が示唆された。細胞における分子の機能は、蛋白発現レベルのみでなく糖鎖修飾によってさらに制御されることは、今後の研究においても重要な視点である。
GnT-V gene expression inhibits the expression of siRNA in choriocarcinoma cell line Jar and its function. siGnT-V introduced strain was tested by MTS assay at 96 hours. The Migration assay is 2.1 times higher for migrating cells and 3.4 times higher for infiltrating cells. GnT-V production inhibition, infiltration, and activation of matrix metalloproteinase were identified by zymography. Second, the extracellular matrix adhesion can be discussed in detail. Villus infiltration can maintain differentiation, membrane surface development, and matrix transformation. Infiltration is most important. The development of a new type of mobile phone is very difficult. It is difficult to find a new type of mobile phone, α1,α5,α6,β1. After immunoprecipitation, L_4-PHA was used to inhibit the growth of GnT-V. Western blot was used to detect the protein expression of α5, β1 and β1 proteins. The possibility of increasing the number of α5β1 molecules in GnT-V and β1-6-G1cNAc locks and inhibiting infiltration is demonstrated. The molecular function of cells and proteins is important for future research.

项目成果

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专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Angiotensin II type 1 receptor expression in ovarian cancer and its correlation with tumour angiogenesis and patient survival.
血管紧张素II型卵巢癌中的1型受体表达及其与肿瘤血管生成和患者存活的相关性。
  • DOI:
    10.1038/sj.bjc.6602961
  • 发表时间:
    2006-02-27
  • 期刊:
  • 影响因子:
    8.8
  • 作者:
    Ino, K;Shibata, K;Kajiyama, H;Yamamoto, E;Nagasaka, T;Nawa, A;Nomura, S;Kikkawa, F
  • 通讯作者:
    Kikkawa, F
Indoleamine 2,3-dioxygenase is a novel prognostic indicator for endometrial cancer.
  • DOI:
    10.1038/sj.bjc.6603477
  • 发表时间:
    2006-12-04
  • 期刊:
  • 影响因子:
    8.8
  • 作者:
    Ino, K;Yoshida, N;Kajiyama, H;Shibata, K;Yamamoto, E;Kidokoro, K;Takahashi, N;Terauchi, M;Nawa, A;Nomura, S;Nagasaka, T;Takikawa, O;Kikkawa, F
  • 通讯作者:
    Kikkawa, F
Twist expression in patients with cervical cancer is associated with poor disease outcome
  • DOI:
    10.1093/annonc/mdm344
  • 发表时间:
    2008-01-01
  • 期刊:
  • 影响因子:
    50.5
  • 作者:
    Shibata, K.;Kajiyama, H.;Kikkawa, F.
  • 通讯作者:
    Kikkawa, F.
INVOLVEMENT OF OLIGOSACCHARIDE CHANGES IN α5β1 INTEGRIN IN MIGRATION OF EXTRAVILLOUS TROPHOBLASTS
α5β1整合素寡糖变化参与绒毛外滋养层细胞迁移
  • DOI:
  • 发表时间:
    2007
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Yamamoto;E et al.
  • 通讯作者:
    E et al.
Genetically identified complete hydatidiform mole coexisting with a live twin fetus: Comparison with conventional diagnosis.
基因鉴定的与活双胞胎胎儿共存的完全葡萄胎:与传统诊断的比较。
  • DOI:
  • 发表时间:
    2007
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Seiji Sumigama;Atsuo Itakura;Toshimichi Yamamoto;et. al.
  • 通讯作者:
    et. al.
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  • 发表时间:
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  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
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  • 通讯作者:
    吉川 史隆
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  • 发表时间:
    2016
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    0
  • 作者:
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  • 通讯作者:
    山本英子,鈴木幸子,石井邦子,大井けい子,森美紀,岡津愛子,林ひろみ,北川良子
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  • 发表时间:
    2016
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    0
  • 作者:
    西野 公博;山本 英子;中村 謙一;佐藤 静香;関谷 陽子;新美 薫;吉川 史隆
  • 通讯作者:
    吉川 史隆
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  • 发表时间:
    2022
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    0
  • 作者:
    小田 結加里;新美 薫;柴田 真由;渡邉 絵里;西野 公博;山本 英子;山田秀人
  • 通讯作者:
    山田秀人

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