ヒト胎盤形成における糖転移酵素GnT-Vの機能と絨毛外栄養膜細胞浸潤機構の解明

阐明糖基转移酶 GnT-V 的功能和绒毛外滋养层细胞侵袭机制在人胎盘形成中的作用

• 批准号: 18799005
• 负责人: 山本 英子
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18799005/
• 关键词: 胎盤; 糖転移酵素; 絨毛外栄養膜細胞; GnT-V; α5β1 integrin

GnT-V発現抑制絨毛外栄養膜細胞(EVT)モデルとして絨毛癌細胞株JarにsiRNAレトロウイルスベクターを遺伝子導入し、機能実験を行った。siGnT-V導入株ではmock株に比べて、MTS assayによる96時間までの増殖能に差は見られなかった。Migration assayおよびmatrigel invasion assayでは遊走細胞は2.1倍に、浸潤細胞は3.4倍に亢進した。GnT-V発現抑制による浸潤能促進機構を明らかにするために、zymographyによるmatrix metalloproteinase活性の変化を確認したが、MMP-2,MMP-9活性ともに変化は認めなかった。次に、細胞外基質への接着能を検討すると、ラミニン、フィブロネクチン、コラーゲンIおよびIVすべてにおいて接着能は亢進していた。絨毛細胞が浸潤能を持つEVTに分化するときには、膜表面に発現するインテグリンのサブタイプが基質の変化とともに変化し、浸潤に最も重要であるのはα5β1インテグンである。インテグリサブタイプの発現をフローサイトメトリーで確かめると、α1,α5,α6,β1インテグリンすべてに発現変化は認めなかった。しかし、α5β1インテグリンによる免疫沈降後にL_4-PHAを用いたレクチンブロットを行うと、α5β1インテグリンヘのβ1-6GlcNAc鎖付加レベルがGnT-V抑制株において明らかに抑制されていた。免疫沈降後に行ったα5、β1インテグリン抗体を用いたWesternblotでもそれぞれの蛋白発現レベルに変化は認めなかった。以上より、ヒトEVTにおいてはGnT-Vがα5β1インテグリンにβ1-6-G1cNAc鎖を付加することによって、浸潤を抑制している可能性が示唆された。細胞における分子の機能は、蛋白発現レベルのみでなく糖鎖修飾によってさらに制御されることは、今後の研究においても重要な視点である。

GnT-V showed inhibition of human hair extracellular membrane cell (EVT), hairy cancer cell line Jar, siRNA cell, cell line, cell line. The colonization of siGnT-V was not the same as that of mock, and the colonization of MTS assay after 96 hours. The cells of Migration assay and matrigel invasion assay were increased by 2.1x and 3.4times respectively. The inhibition of GnT-V can promote the mechanism to determine the activity of matrix metalloproteinase, the activity of MMP-2,MMP-9 and the activity of MMP-2,MMP-9. After that, the extracellular base can be used to treat IV, and then it can cause hyperactivity. The hair cells can be immersed in EVT to differentiate and differentiate, and the surface of the membrane can be seen. The surface of the membrane is the most important, the most important. I don't know what to do. I don't know. I don't know what to do. After immunoprecipitation, L _ 4-PHA was immunized with α 5 β 1, α 5 β 1, α 5 β 1, β 1-6GlcNAc and GnT-V suppressor. After immuno-sedimentation, the antibody against alpha-5 and β-1 was detected with Westernblot protein. The above, EVT, GnT-V, α 5 β 1, β 1-6-G1cNAc, and immersion suppresses the possibility of instigation. The molecular machinery can be detected, the protein can be detected, the sugar can be repaired, the equipment can be controlled, and the important points will be studied in the future.

项目成果

Angiotensin II type 1 receptor expression in ovarian cancer and its correlation with tumour angiogenesis and patient survival.

血管紧张素II型卵巢癌中的1型受体表达及其与肿瘤血管生成和患者存活的相关性。

• DOI: 10.1038/sj.bjc.6602961
• 发表时间: 2006-02-27
• 期刊: BRITISH JOURNAL OF CANCER
• 影响因子: 8.8
• 作者: Ino, K;Shibata, K;Kajiyama, H;Yamamoto, E;Nagasaka, T;Nawa, A;Nomura, S;Kikkawa, F
• 通讯作者: Kikkawa, F

Indoleamine 2,3-dioxygenase is a novel prognostic indicator for endometrial cancer.

• DOI: 10.1038/sj.bjc.6603477
• 发表时间: 2006-12-04
• 期刊: BRITISH JOURNAL OF CANCER
• 影响因子: 8.8
• 作者: Ino, K;Yoshida, N;Kajiyama, H;Shibata, K;Yamamoto, E;Kidokoro, K;Takahashi, N;Terauchi, M;Nawa, A;Nomura, S;Nagasaka, T;Takikawa, O;Kikkawa, F
• 通讯作者: Kikkawa, F

Twist expression in patients with cervical cancer is associated with poor disease outcome

• DOI: 10.1093/annonc/mdm344
• 发表时间: 2008-01-01
• 期刊: ANNALS OF ONCOLOGY
• 影响因子: 50.5
• 作者: Shibata, K.;Kajiyama, H.;Kikkawa, F.
• 通讯作者: Kikkawa, F.

INVOLVEMENT OF OLIGOSACCHARIDE CHANGES IN α5β1 INTEGRIN IN MIGRATION OF EXTRAVILLOUS TROPHOBLASTS

α5β1整合素寡糖变化参与绒毛外滋养层细胞迁移

• 发表时间: 2007
• 作者: Yamamoto;E et al.
• 通讯作者: E et al.

Genetically identified complete hydatidiform mole coexisting with a live twin fetus: Comparison with conventional diagnosis.

基因鉴定的与活双胞胎胎儿共存的完全葡萄胎：与传统诊断的比较。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Gynecol Obstet Inves 30(64)
• 作者: Seiji Sumigama;Atsuo Itakura;Toshimichi Yamamoto;et. al.
• 通讯作者: et. al.