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耳垢型決定遺伝子が薬剤感受性に与える影響に関する研究

耳垢分型基因对药物敏感性影响的研究

基本信息

批准号：
18890142
负责人：
三輪晋智
金额：
$ 0.88万
依托单位：
Nagasaki University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (Start-up)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

1.ABCC11持続的発現細胞株通常の発現ベクターにABCC11を導入して持続的発現細胞株を作製したが、継代を重ねるうちに発現が消失してしまった。そのためTet-Offの系を用いたABCC11持続的発現細胞株を作製した。用いた細胞株はイヌ腎上皮細胞株MDCKとブタ腎上皮細胞株LLC-PK1である。しかしどちらの系でもウェスタンブロッティングにおいてMRP8の発現が認められなかった。ABCC11持続的発現細胞株の樹立が困難なため計画していた乾型または湿型ABCC11持続的発現細胞株の薬剤耐性能の検討を行うことができなかった。2.乾型、湿型腋窩アポクリン腺組織の免疫染色乾型、湿型耳垢のヒトの腋窩アポクリン腺組織の手術標本が入手できたため、抗MRP8抗体を用いて免疫染色を行った。湿型アポクリン腺においてMRP8はapical membraneに明瞭に染色されたが、同時に核とapical membraneの問の細胞質において球状に染色される部分が観察された。乾型アポクリン腺においてはapical membraneが染色されたが、湿型と比べてやや境界不明瞭な感があった。また、細胞質には明らかに染色されている部分は認められなかった。3.バキュロウィルスを用いた乾型と湿型MRP8の差の検討乾型と湿型MRP8を発現するバキュロウィルスを作製し、昆虫細胞株Sf9に感染させてMRP8membrane vesicleを抽出した。湿型MRP8の抽出は可能であったが、乾型MRP8の抽出は困難であった。今後乾型と湿型の差の検討は断念し、湿型MRP8の基質の検討を行っていこうと考えている。

The present cell line of 1.ABCC11 is usually transformed into the present cell line of 1.ABCC11, which can be used as a cell line, and its generation is heavy to detect disappearance. The mother Tet-Off line uses the existing cell line which is held by the mother ABCC11 as the carrier. The epithelial cell line MDCK was isolated and the epithelial cell line LLC-PK1 was used. I don't know. I don't know. ABCC11 showed that the cell line was isolated from dry cell line and wet cell line from wet ABCC11 cell line. two。 The glandular tissue of dry and wet axillary tissue was stained by immunostaining for dry and wet earwax. The tissue of axillary gland of dry and wet type was labeled with the manual label, and the anti-MRP8 antibody was used for immunostaining. Wet MRP8 apical membrane was used to understand the staining effect, and at the same time, nuclear apical membrane staining was performed in the cells and globular staining was performed. The dry type is better than the wet type, and the apical membrane staining is better than the dry type. In the first place, the cells were stained, and some of the samples were stained. 3. The dry type, the wet type, the wet type, the dry type, the wet type, the wet type, the dry type, the wet type, Wet MRP8 extraction may be difficult to extract, dry MRP8 may be difficult to extract. In the future, the dry type is dry, the wet type is poor, and the wet type is MRP8.