神経障害性の痛みの遺伝子治療を目指した非ウイルスベクターの創製
创建用于神经性疼痛基因治疗的非病毒载体
基本信息
- 批准号:06F06106
- 负责人:
- 金额:$ 1.54万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for JSPS Fellows
- 财政年份:2006
- 资助国家:日本
- 起止时间:2006 至 2007
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
病気の際のみではなく、手術後においても、痛みは患者にとって大きな苦痛となっている。痛みのコントロールの臨床的意義の大きなことは言うまでもない。しかしながら、わが国では、この痛みに対する研究はあまり活発に行われていない。本研究の目的は、末梢神経特異的な遺伝子導入および発現効率の高い非ウイルス性遺伝子キャリアを研究開発し、痛みをコントロールする遺伝子やsmall-interfering RNA (siRNA)を神経細胞特異的に末梢から逆行性に導入する技術を確立することである。本年度は、昨年度の研究で得られた、末梢神経細胞への遺伝子発現効率が最も高い非ウイルス性遺伝子キャリア(カチオン化プルラン)を用いて、動物実験を行い、神経細胞体への逆行性の遺伝子導入について検討した。カチオン化プルランとルシフェラーゼをコードするプラスミドDNAとからなるポリイオンコンプレックスをラットの下肢、フットパットより投与し、その遺伝子発現部位を調べた。その結果、フットパット、末梢神経の後根神経節、および坐骨神経での発現を検出することができた。また、緑色蛍光蛋白質(GFP)をコードするプラスミドDNAを用いた同様の実験において、GFPの発現を免疫組織化学染色により検出できた。遺伝子発現の増強を目的として、核移行シグナル分子およびレクチンなどを組み込んだカチオン化プルランの作製を試みたが期待通りのものを作製することはできなかった。カチオン化プルランとルシフェラーゼをコードするプラスミドDNAとからなるポリイオンコンプレックスは、骨髄(MSC)および脂肪由来間葉系幹細胞(ASC)に対しても高いルシフェラーゼ発現を示した。得られたルシフェラーゼ発現MSCをくも膜下腔内へ投与したところ、MSCは脊髄へ生着し、ルシフェラーゼを発現することがわかった。
Disease 気 の interstate の み で は な く, surgery に お い て も, pain み は patients に と っ て big き な pain と な っ て い る. The clinical significance of the pain み, コ, コ, トロ, トロ, な is huge, <s:1> な, な, と, な, うまで, な, な. し か し な が ら, わ が countries で は, こ の pain み に す seaborne る research は あ ま り live 発 に line わ れ て い な い. は の purpose, this study peripheral god 経 な of specific 伝 son import お よ び 発 の is sharper rate high い non ウ イ ル ス sex heritage 伝 son キ ャ リ ア を research open 発 し, pain み を コ ン ト ロ ー ル す る heritage 伝 son や small interfering RNA (siRNA)を neuro-cell-specific に terminal ら retrograde に introduction する technology を established する する とである とである とである. は this year, yesterday's annual の research で ら れ た, peripheral god 経 cell へ の posthumous son 伝 が 発 now working rate most high も い ウ イ ル ス sex heritage 伝 son キ ャ リ ア (カ チ オ ン change プ ル ラ ン) を with い て, animal be 験 を い, god 経 cell body へ の retrograde の heritage 伝 son import に つ い て beg し 検 た. カ チ オ ン change プ ル ラ ン と ル シ フ ェ ラ ー ゼ を コ ー ド す る プ ラ ス ミ ド DNA と か ら な る ポ リ イ オ ン コ ン プ レ ッ ク ス を ラ ッ ト の lower limbs, フ ッ ト パ ッ ト よ り cast and し そ の heritage 伝 son 発 now parts を adjustable べ た. The results of そ そ, フットパット, the posterior root Shinto section of the peripheral Shinto, and the および ischial Shinto で are manifested in を検, する, とがで, and た た. 蛍 ま た, green light protein (GFP) を コ ー ド す る プ ラ ス ミ ド を DNA with い た with others の be 験 に お い て, GFP の 発 now を immunohistochemical staining に よ り 検 out で き た. Posthumous son 伝 発 purpose is の raised strong を と し て, nuclear migration シ グ ナ ル molecular お よ び レ ク チ ン な ど を group み 込 ん だ カ チ オ ン change プ ル ラ ン の cropping を try み た が expect tong り の も の を cropping す る こ と は で き な か っ た. カ チ オ ン change プ ル ラ ン と ル シ フ ェ ラ ー ゼ を コ ー ド す る プ ラ ス ミ ド DNA と か ら な る ポ リ イ オ ン コ ン プ レ ッ ク ス は, bone marrow (MSC) お よ び fat origin between the leaves of stem cells (ASC) に し seaborne て も high い ル シ フ ェ ラ ー ゼ 発 を now shown し た. Have ら れ た ル シ フ ェ ラ ー ゼ 発 now MSC を く も film inferior vena へ shot within and し た と こ ろ, MSC は spinal marrow へ with し, ル シ フ ェ ラ ー ゼ を 発 now す る こ と が わ か っ た.
项目成果
期刊论文数量(0)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Nontoxic genetic engineering of adult stem cells with negatively charged pullulan-spermin/dna nanoparticles
使用带负电荷的支链淀粉-精子/DNA纳米粒子对成体干细胞进行无毒基因工程
- DOI:
- 发表时间:2007
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:H. Yokoyama;H. -C. Guo;J. Shikata;K. Sato;et. al.;Devang Thakor
- 通讯作者:Devang Thakor
Retrograde sensory neuron gene transfer by subcutaneous injection of negatively charged pullulan-spermine/dna polyion complexes
通过皮下注射带负电荷的支链淀粉-精胺/DNA聚离子复合物进行逆行感觉神经元基因转移
- DOI:
- 发表时间:2007
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:申 鉉日;永井展裕;村田勝;棟方正信ら;Shen Xuan Ri;Devang Thakor
- 通讯作者:Devang Thakor
Negatively charged pullulan-spermine/DNA nanoparticles for in vitro and in vivo gene delivery to sensory neurons
带负电荷的支链淀粉-精胺/DNA纳米粒子,用于体外和体内基因递送至感觉神经元
- DOI:
- 发表时间:2007
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:申 鉉日;永井展裕;村田勝;棟方正信ら;Shen Xuan Ri;Devang Thakor;Devang Thakor
- 通讯作者:Devang Thakor
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直接覆髄にBMP配合アルギン酸ゲルを用いた場合の硬組織反応
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- DOI:
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- 影响因子:0
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吉山 昌宏
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- 资助金额:
$ 1.54万 - 项目类别:
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- 资助金额:
$ 1.54万 - 项目类别:
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超音波を利用したin vitroおよびin vivoでの遺伝子導入の増強
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- 批准号:
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