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神経障害性の痛みの遺伝子治療を目指した非ウイルスベクターの創製

创建用于神经性疼痛基因治疗的非病毒载体

基本信息

批准号：
06F06106
负责人：
田畑泰彦
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06F06106/
关键词：
痛み siRNA 末梢神経非ウイルス性遺伝子キャリア痛み関連遺伝子

项目摘要

病気の際のみではなく、手術後においても、痛みは患者にとって大きな苦痛となっている。痛みのコントロールの臨床的意義の大きなことは言うまでもない。しかしながら、わが国では、この痛みに対する研究はあまり活発に行われていない。本研究の目的は、末梢神経特異的な遺伝子導入および発現効率の高い非ウイルス性遺伝子キャリアを研究開発し、痛みをコントロールする遺伝子やsmall-interfering RNA (siRNA)を神経細胞特異的に末梢から逆行性に導入する技術を確立することである。本年度は、昨年度の研究で得られた、末梢神経細胞への遺伝子発現効率が最も高い非ウイルス性遺伝子キャリア(カチオン化プルラン)を用いて、動物実験を行い、神経細胞体への逆行性の遺伝子導入について検討した。カチオン化プルランとルシフェラーゼをコードするプラスミドDNAとからなるポリイオンコンプレックスをラットの下肢、フットパットより投与し、その遺伝子発現部位を調べた。その結果、フットパット、末梢神経の後根神経節、および坐骨神経での発現を検出することができた。また、緑色蛍光蛋白質(GFP)をコードするプラスミドDNAを用いた同様の実験において、GFPの発現を免疫組織化学染色により検出できた。遺伝子発現の増強を目的として、核移行シグナル分子およびレクチンなどを組み込んだカチオン化プルランの作製を試みたが期待通りのものを作製することはできなかった。カチオン化プルランとルシフェラーゼをコードするプラスミドDNAとからなるポリイオンコンプレックスは、骨髄(MSC)および脂肪由来間葉系幹細胞(ASC)に対しても高いルシフェラーゼ発現を示した。得られたルシフェラーゼ発現MSCをくも膜下腔内へ投与したところ、MSCは脊髄へ生着し、ルシフェラーゼを発現することがわかった。

The patient suffers from severe pain, pain after surgery, and pain. The clinical significance of pain and pain is great. The study of the relationship between the two countries is very important. The purpose of this study is to develop and establish a technique for gene and small-interfering RNA (siRNA) retrogressive gene introduction into neurons by studying the high efficiency of gene transfer and gene expression in peripheral neurons. This year's study compared with last year's study, the highest rate of gene expression in peripheral neurons, the highest rate of gene expression in animals, and the highest rate of gene expression in retrograde neurons. The gene expression of DNA was modulated by the gene expression of DNA, protein and protein. The results of the study, the development of brain tissue, and the development of sciatic nerve tissue, were analyzed. Green fluorescent protein (GFP) was detected by immunohistochemical staining in the same manner as in the case of DNA. The purpose of the development of nuclear power plants is to increase the efficiency of nuclear power plants and to increase the efficiency of nuclear power plants. The development of stem cells derived from mesenchymal stem cells (ASC) and bone marrow cells (MSC) is demonstrated by the development of cell DNA and cell culture. It has been discovered that MSC has been cast into the cavity of the membrane, MSC has been born in the ridge, and it has been discovered.