クルマエビアラニンラセマーゼの発現解析と脱皮における機能解析

车鲁马虾丙氨酸消旋酶的表达分析及蜕皮过程中的功能分析

• 批准号: 18780161
• 负责人: 吉川 尚子
• 金额: $ 2.3万
• 依托单位: Saitama Medical University (2007)The University of Tokyo (2006)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18780161/
• 关键词: 酵素; アラニンラセマーゼ; D型アミノ酸; D-アラニン; クルマエビ; 脱皮; アラニン

本研究では、アラニンラセマーゼを通じてクルマエビにおけるD-Alaの生理機能を明らかにすることを目的とし、平成19年度は、クルマエビの高浸透圧条件下および脱皮がアラニンラセマーゼ遺伝子発現に及ぼす影響について検討するとともに、アラニンラセマーゼおよびD-Alaの細胞内分布を明らかにしようと試みた。1.クルマエビの高浸透圧ストレスおよび脱皮がアラニンラセマーゼに及ぼす影響についてクルマエビを100%から150%海水に順応させた時の、それぞれの組織のアラニンラセマーゼ遺伝子の発現量を測定したところ、D-Ala含量と同様に、肝膵臓において著しい増加が認められたものの、他の組織においては発現量の変動はみられなかった。したがって、肝膵臓では高浸透圧条件下において、アラニンラセマーゼ遺伝子の発現量の増加にともないD-Alaが増加することが明らかとなった。また、脱皮とアラニンラセマーゼおよびD-Ala含量との関連性について検討するために、脱皮段階を3ステージに分けてサンプリングし、D-Ala含量およびアラニンラセマーゼのmRNA発現量を測定したところ、脱皮直前のステージの筋肉ではアラニンラセマーゼ遺伝子の発現量の増加が認められたものの、遊離D-Ala含量の変動はみられなかった。脱皮前期の筋肉において生成されたD-Alaは、脱皮の過程で利用されていることが示唆された。2.クルマエビアラニンラセマーゼおよびD-Alaの細胞内分布についてD-Alaおよびアラニンラセマーゼの細胞内分布を明らかにするために免疫染色を行った。アラニンラセマーゼ抗体はクルマエビアラニンラセマーゼの演繹アミノ酸配列からペプチドを設計し、抗ペプチド抗体を作製した。その結果、筋肉および肝膵臓ではいずれも細胞質に存在することが示唆されたが、抗体との反応性が低く、今回の検討では明確な分布は確認できなかった。

In this study, the physiological function of D-Ala was clarified under the condition of high osmotic pressure in Heisei 19, and the intracellular distribution of D-Ala was clarified under the condition of high osmotic pressure. 1. Determination of the amount of D-Ala in the tissue of the high permeability of the soil and the influence of the high permeability of the soil and the influence of the high permeability of the soil. He organized the movement of the body and the movement of the body. The increase in the amount of D-Ala produced under high permeability conditions D-Ala content and the correlation between desquamation, desquamation and D-Ala content and mRNA expression were determined. The increase of D-Ala content and mRNA expression in desquamation and D-Ala content was detected. D-Ala is produced in the early stage of dehulling, and the dehulling process is utilized in the middle stage of dehulling. 2. The intracellular distribution of D-Ala and D-Ala was detected by immunostaining. The design and production of anti-tumor antibodies are based on the analysis of tumor cell DNA sequences. The results showed that there was a low level of antibody reactivity and a clear distribution of antibodies in the cytoplasm.

项目成果

Gene expression of alanine racemase in kuruma prawn Marsupenaeus Japonicus

日本对虾丙氨酸消旋酶基因表达

• 发表时间: 2007
• 作者: 駄田井久;佐藤豊信;中島祐喜;駄田井久,吉田晋一,竹内重吉,佐藤豊信;吉田晋一,佐藤豊信,駄田井久;吉川 尚子;池見亮,駄田井久,佐藤豊信;吉川 尚子;井上智博,駄田井久,佐藤豊信;竹内重吉,佐藤豊信,駄田井久;吉川 尚子
• 通讯作者: 吉川 尚子

Gene expression of alanine recemase in kuruma prawn Marsupenaeus japonicus

日本对虾丙氨酸还原酶基因表达

• 发表时间: 2007
• 期刊: Amino Acids 33
• 作者: 駄田井久;佐藤豊信;中島祐喜;駄田井久,吉田晋一,竹内重吉,佐藤豊信;吉田晋一,佐藤豊信,駄田井久;吉川 尚子
• 通讯作者: 吉川 尚子

クルマエビの高浸透圧ストレス下におけるアラニンラセマーゼ遺伝子の発現解析

高渗胁迫下虎虾丙氨酸消旋酶基因的表达分析

• 发表时间: 2007
• 作者: 駄田井久;佐藤豊信;中島祐喜;駄田井久,吉田晋一,竹内重吉,佐藤豊信;吉田晋一,佐藤豊信,駄田井久;吉川 尚子;池見亮,駄田井久,佐藤豊信;吉川 尚子
• 通讯作者: 吉川 尚子