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RINとRab5ファミリーの協調による小胞輸送機構の解析

RIN与Rab5家族合作分析囊泡转运机制

基本信息

批准号：
18790046
负责人：
梶保博昭
金额：
$ 2.24万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790046/
关键词：
エンドサイトーシスメンブレントラフィック低分子量G蛋白質 Rab GEF

项目摘要

申請者は新規のRab5GEFであるRINファミリーの機能解析を進めており、本研究ではRINファミリーによるRab5ファミリーの活性化機構解明を目的として以下の知見を得た。1、RINファミリーとRab5ファミリー間の作用に関する生化学的特性の解析細胞内におけるRINによるRab5ファミリーのGEF活性を、[32Pi]により標識した培養細胞におけるRab5ファミリーと結合するGTP/GDPの比率変化を指標に検討した。その結果RIN2、RIN3は他のRab5GEFと異なりRab22やRab31のGTP結合量を特異的に増大させた事から、細胞内でRIN2、RIN3がRab22、Rab31のGEFとして機能する事を新たに見出した。2、Rab5ファミリーの細胞内局在の検討Rab22が局在している細胞内小器官を同定するために各種オルガネラマーカーにより免疫染色したところ、Rab22は初期エンドソームおよび微小管に局在する事を明らかとした。また、RIN2、RIN3とRab22、Rab31との共発現によりRab22、Rab31が局在している小胞が巨大化する事、さらにこの巨大化がRIN2、RIN3のGEF活性に依存的であることも同時に見出しだ。またTime lapse imagingによりRIN3とRab22、31が細胞内でダイナミックに動くことを見出した。以上の結果より、RIN2、RIN3がRab5のみならずRab22、Rab31のGEFとしても機能することで複雑なエンドサイトーシスを巧みに調節している可能性が示された。

The applicant was able to analyze the new Rab5GEF information and RIN information. In this study, the following information was obtained through the analysis of the RIN information, the Rab5 response and the activation mechanism. 1. RIN is sensitive to Rab5. The biochemical properties of biochemistry are analyzed. Intracellular RIN, Rab5, GEF activity, [32Pi], label culture, cell culture, Rab5 activity, GTP/GDP ratio are analyzed. The results showed that RIN2, RIN3, Rab5GEF, Rab22, Rab31, GTP, intracellular RIN2, RIN3, and Rab31 GEFET were newly reported. 2. The intracellular bureau of the Rab5 cell is responsible for the determination of all kinds of small organs in the cell of the Rab22. The immunoreactivity of immunostaining and that of the microtube in the early stage of Rab22 are the same as those in the cytosol. Experiments, RIN2, RIN3Rab22, Rab31users show that Rab22, Rab31s are in the process of maximizing the size of small cells, maximizing the size of RIN2, RIN3 and GEF activity-dependent mechanisms at the same time. "Time lapse imaging", "RIN3" Rab22, "31", "intracellular", "cellular", "action", "outgoing". As a result of the above results, RIN2, RIN3, Rab5, Rab22, Rab31, GEF, and Rab31 are able to copy copies, copy, copy