アミノ酸トランスポータATAの細胞内トラフィッキングを制御する分子群の同定

鉴定控制氨基酸转运蛋白 ATA 细胞内运输的分子

• 批准号: 18790138
• 负责人: 畠中 貴弘
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Mitsubishi Kagaku Institute of Life Sciences
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790138/
• 关键词: トランスポータ; 細胞内トラフィック; アミノ酸; 糖尿病; 蛋白質; 薬物動態学; 栄養学; 生理学

マウスATA2(mATA2)のポリクローナル抗体2種類をウサギを2羽ずつ用いて作製し、評価した。EGFP-mATA2をHEK293細胞に一過性に発現させ、ライセートを電気泳動し、ウェスタンブロットを行った。その結果、抗GFP抗体によるシグナルと一致するサイズに抗ATA2抗体のシグナルが得られるものがあった。内因性のATA2と思われるバンドも見られたが詳細は検討の余地がある。また、pull-down法によりATA2に結合する蛋白の情報を収集した。FLAG tagをつけたATA2コンストラクトを作製し、HEK293細胞に導入した。そのライセートを用いて抗FLAG抗体で免疫沈降を行い、質量分析計で蛋白の同定を行った。しかし、注目すべき特異的な蛋白は見つからなかった。前年度と合わせて本研究では、ATA2の細胞内トラフィッキングに関して、細胞膜へのtranslocation(exocytosis)にインスリンシグナル、degradationにプロテアソーム系の関与を明らかにし、更にポリユビキチン化によるinternalization(endocytosis)を示し、脂肪細胞におけるATA2の細胞内トラフィッキングの機構の詳細を明らかにした。つまり、本研究では、脂肪細胞におけるATA2のstorage→exocytosis→endocytosis→degradationもしくは再storageのモデルを完成させた。これらの成果の一部を第40回日本発生生物学会・第59回日本細胞生物学会合同大会でポスター発表した。また、これらの研究成果が認められ、第2回トランスポーター研究会にシンポジストとして招待され講演した。

2 types of antibodies are included in the list of ATA2 (mATA2). EGFP-mATA2 was transiently detected in HEK293 cells, activated by electricity, and activated by electricity. The results were consistent with those of anti-GFP antibodies and anti-ATA2 antibodies. The internal factors of ATA2 are discussed in detail. The pull-down method collects information about ATA2 binding proteins. FLAG tag is introduced into HEK293 cells. Anti-FLAG antibodies are used to immunize and stabilize proteins by mass spectrometry. A special protein can be seen in the eye. In previous years, this study focused on the relationship between ATA2 intracellular transformation and cellular membrane translocation(exocytosis), degradation and degradation, and the relationship between ATA2 intracellular transformation and cellular degradation. This study was conducted on adipocyte storage→exocytosis→endocytosis→degradation → restorage. The 40th Japan Society of Biological Sciences and the 59th Japan Society of Cell Biology Conference The results of this research were recognized and presented at the 2nd session of the Conference.

项目成果

Cellular recognition of functionalized with folic acid nanoparticles

• DOI: 10.1380/ejssnt.2007.23
• 发表时间: 2007-01
• 期刊: E-journal of Surface Science and Nanotechnology
• 影响因子: 0.7
• 作者: S. Taira;T. Hatanaka;S. Moritake;Y. Kai;Y. Ichiyanagi;M. Setou

脂肪細胞におけるインスリンによるアミノ酸トランスポーターATA2の細胞内輸送制御

胰岛素对脂肪细胞中氨基酸转运蛋白 ATA2 细胞内转运的调节

• 发表时间: 2007
• 作者: 畠中貴弘;瀬藤光利;畠中貴弘
• 通讯作者: 畠中貴弘

Preparation of Amino Acid Conjugated Nano-Magnetic Particles for Delivery Systems

用于递送系统的氨基酸共轭纳米磁性颗粒的制备

• 发表时间: 2007
• 期刊: e-J Surf. Sci. Nanotech. 5
• 作者: Shinji Moritake;Shu Taira;Yuko Ichiyanagi;Nobuhiro Morone;Si-Young Song;Takahiro Hatanaka;Shigeki Yuasa;Mitsutoshi Setou;Shu TAIRA;Shinji MORITAKE;Yuko Ichiyanagi;Yuko Ichiyanagi;Y.Ichiyanagi et al.;Y.Ichiyanagi et al.;Y.Ichiyanagi et al.;Y.Ichiyanagi et al.
• 通讯作者: Y.Ichiyanagi et al.

Regulation of amino acid transporter ATA2 by ubiquitin ligase Nedd4-2

• DOI: 10.1074/jbc.m606577200
• 发表时间: 2006-11-24
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Hatanaka, Takahiro;Hatanaka, Yasue;Setou, Mitsutoshi
• 通讯作者: Setou, Mitsutoshi

Functionalized nano-magnetic particles for an in vivo delivery system

• DOI: 10.1166/jnn.2007.216
• 发表时间: 2007-03-01
• 期刊: JOURNAL OF NANOSCIENCE AND NANOTECHNOLOGY
• 作者: Moritake, Shinji;Taira, Shu;Setou, Mitsutoshi
• 通讯作者: Setou, Mitsutoshi