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下垂体濾胞星状細胞の発生学的運命の追跡

追踪垂体滤泡星形胶质细胞的胚胎命运

基本信息

批准号：
18790150
负责人：
幸喜富
金额：
$ 2.24万
依托单位：
Jichi Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790150/
关键词：
下垂体内分泌細胞濾胞星状細胞組織修復・再生ラット

项目摘要

下垂体前葉(PD)内で濾胞星状細胞(FS細胞)が体性幹細胞としての役割を持つか検討するため、ラットPDを外科的に部分切除し、損傷修復・再生に伴う動態をFS細胞に着目して観察した。Wistar系雄ラット12週齢の頭蓋底側から周咽頭法によりPDを露出し、18G注射針を具えた1mlシリンジでPD左側部を吸引しPD組織小片を切除した。動物は通常条件下で飼育し、3日、1、2、4、8週および180日後に屠殺して残存するPDを得た。摘出PDは昇汞ホルマリンで浸漬固定、パラフィン包埋を経て、5μm厚に薄切された。結果として、肉眼解剖学的レベルでは、部分切除後3日から180日に至るまでPDの器官形態の再生は見られなかった。組織学的レベルでの再生の指標として、部分切除個体で細胞増殖の頻度が上昇しているか調べるため、増殖細胞核内抗原PCNAの免疫染色を行ったところ、正常個体PDに比べ、非損傷部位には変化が認められなかったが、損傷部位には多くのPCNA陽性細胞核が検出された。これらがFS細胞であるか否かを調べるためS100タンパクとPCNAとの二重免疫染色を行ったが、S100陽性反応は損傷部位に集積せずPCNA陽性反応と共存しなかった、すなわちFS細胞の増殖はみられなかった。さらに部分切除による生化学レベルでの影響がみられるか、部分切除2週間後個体および正常個体の下垂体からmRNAを抽出し、cDNAマイクロアレイ法により両者の遺伝子発現頻度を比較・検討したが、増殖因子、誘導因子、接着因子等、再生に関わるとみられる遺伝子の顕著な発現変動は認められなかった。今回の実験では、部分切除条件下でもFS細胞は増殖しない事、また下垂体そのものが解剖学、生化学レベルで再生の様相を示さないことがわかった。今後、FS細胞が下垂体前葉ホルモン産生細胞前駆細胞であるか検討するには、再生とは別の観点から迫る必要がある。

Filtered stellate cells (FS cells) in the anterior lobe of the pituitary gland (PD) are observed in somatic stem cells, including partial excision, injury repair and regeneration. Wistar male 12 weeks old, the bottom of the skull, the throat, the PD, the left side of the PD, the 18-gauge needle, the suction, the PD, the tissue, the tissue. The animals were bred under normal conditions for 3 days, 1, 2, 4, 8 weeks, and 180 days. The PD is immersed in mercury and fixed, embedded and thin-cut with a thickness of 5μm The results showed that the morphological regeneration of PD organs was observed from 180 days to 3 days after partial resection. Histological indicators of regeneration, frequency of cell proliferation in partially excised individuals increased, PCNA immunostaining in proliferated cells increased, PD in normal individuals increased, PCNA-positive nuclei increased in non-injured sites, PCNA-positive nuclei increased in injured sites. S100 positive staining for PCNA and double immunostaining for FS cells. S100 positive staining for PCNA and double immunostaining for FS cells. S100 positive staining for PCNA and double immunostaining for PCNA. S100 positive staining for PCNA. S100 positive staining for PCNA and double immunostaining for PCNA. S100 positive staining for PCNA and double immunostaining for PCNA. S100 positive staining for PCNA and double immunostaining for PCNA. The effects of partial excision on biochemical changes were compared. mRNA and cDNA were extracted from pendulous and normal individuals 2 weeks after partial excision. The frequency of gene expression in pendulous and normal individuals was compared. The results showed that gene expression was related to reproduction, proliferation factor, induction factor, adhesion factor, etc. In the present study, the anatomical and biochemical characteristics of FS cells under partial excision were studied. In the future, FS cells are required to regenerate and differentiate from the anterior lobe of the pituitary gland.