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Galectin-1を介した膵癌細胞-膵星細胞間相互作用の解明

阐明Galectin-1介导的胰腺癌细胞与胰腺星状细胞之间的相互作用

基本信息

批准号：
18790440
负责人：
菊田和宏
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790440/
关键词：
膵星細胞膵線維化膵癌 galectin-1 糖鎖 desmoplastic reaction 膵癌細胞

项目摘要

平成19年度は、1)膵癌細胞株における組み換えgalectin-1投与による細胞内シグナル伝達の解析、2)組み換えgalectin-1投与による膵癌細胞株の細胞増殖の解析、3)galectin-1 siRNA発現ベクターの作成、4)ヒト膵星細胞galectin-1 siRNA安定発現株の作成、を行なった。抗リン酸化抗体を用いたWesternblottingを用いた解析では、組み換えgalectin-1投与により、膵癌細胞株PANC-1のERK、p38が活性化されることが示唆された。また、BrdUELISA法を用いた解析では、膵癌細胞株AsPC-1、PANC-1は、組み換えgalectin-1投与により、濃度依存性に増殖が抑制される傾向が認められた。外因性のgalectin-1による細胞増殖抑制はneuroblastomaなどでも報告されており、これに類似した所見と考えられた。次にヒト膵星細胞における内因性のgalectin-1の働きを調べるために、galectin-1 siRNA安定発現株の作成を試みた。Galectin-1(NM002305)のsiRNA配列をCAGATGGATACGAATTCAAと設計し、shRNAの形で発現するようにデザインし、タカラバイオ社のpBAsi hU6 Neo DNAベクターを用いてsiRNA発現ベクターを作成した。ロシュ社FuGENE6トランスフェクション試薬を用いて培養ヒト膵星細胞にベクターを導入し、G418を用いてクローンを2つ選択した。現在、これらのクローンの機能解析を行なっているところである。これまで外因性のgalectin-1が膵星細胞の増殖とケモカイン産生を促進することを報告してきたが、今後、alectin-1発現抑制クローンを用いることにより膵星細胞と膵癌細胞株の相互作用におけるgalectin-1の働きについて更に詳細な解析を行なう予定である。

In 2009, 1) Analysis of intracellular expression of Galectin-1 in human cancer cell lines, 2) Analysis of cell proliferation of human cancer cell lines by Galectin-1 administration, 3) Preparation of Galectin-1 siRNA expression vector, 4) Preparation of Galectin-1 siRNA stable expression vector in human astrocytes, and 4) Preparation of Galectin-1 siRNA stable expression vector. Western blotting analysis of anti-ERK antibodies was performed in the presence of galectin-1 and the activation of ERK and p38 in PANC-1 cells. Analysis of tumor cell lines AsPC-1 and PANC-1 by ELISA showed that the growth of tumor cells was inhibited by galectin-1 in a concentration-dependent manner. Exogenous galectin-1 inhibits cell proliferation in neuroblastoma and is similar to that observed. In addition, the production of galectin-1 siRNA was also studied. siRNA alignment for Galectin-1(NM002305) was designed by CAGATGGATACGAATTCAA and shRNA was developed using pBAsi hU6 Neo DNA. Fugene6 is the first to be used in the culture of astrocytes, and G418 is the second to be used in the culture of astrocytes. Now, the function analysis of the " This report describes the role of exogenous galectin-1 in promoting astrocyte proliferation and production, and in the future, the role of galectin-1 in inhibiting astrocyte proliferation and production in cancer cell lines.