自己免疫性肝疾患の病態に関わる非メチル化DNA発現プロファイルのゲノムワイド解析

与自身免疫性肝病病理相关的非甲基化 DNA 表达谱的全基因组分析

• 批准号: 18790479
• 负责人: 益井 芳文
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Jikei University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790479/
• 关键词: AIH; PBC; メチル化DNA; 非メチル化DNA; DNA発現プロファイル

§疾患特異的メチル化・非メチル化DNAの免疫調節作用の検討*非メチル化DNAの免疫刺激機能疾患特異的発現非メチル化DNAに準じ作製したオリゴデオキシヌクレオチド(ODNs)を、AIH・PBC症例、健常人それぞれの樹状細胞とT細胞(MACSを用い分離)を混合培養した自己リンパ球活性化反応系に添加、T細胞増殖を^3H-Thymidine取込み法で、IL-12産生をELISA法で測定し、疾患特異的発現非メチル化DNAによる免疫刺激作用を解析した。その結果、AIH症例ではODNs刺激によるT細胞増殖を認めたが、PBC症例ではODNs刺激によるT細胞増殖を認めず、疾患間で差異を認めた。一方、ODNs刺激によるIL-12産生はAIH、PBCでともに認められなかった。そのため、IFNγ産生も併せて検討したが、やはりAIH、PBCともに認められず、非メチル化DNAはT細胞増殖促進効果は有するものの、サイトカイン産生効果は有さないことが明らかにされた。*メチル化DNAの免疫抑制機能自己免疫性肝疾患での発現が弱いメチル化DNAに準じて作製したODNsを、in vitroでDNAメチラーゼ、Sアデノシルメチオニン、メチル化バッファーで処理し再メチル化する。このODNsを上記実験系に添加し、疾患特異的低発現メチル化ODNsによる疾患特異的発現非メチル化DNAの免疫刺激作用の抑制効果を解析した。その結果、AIH、PBCいずれにおいても、T細胞増殖反応、サイトカイン産生反応のいずれも認めず、メチル化DNAが免疫抑制機能を有することが示された。なお、患者本人が承諾の上で末梢血検体採取を施行した。

§ disease specific メ チ ル is changed, the メ チ ル immunoregulatory effects the DNA の の 検 for * the メ チ ル の immune stimulation function of disease specific DNA of 発 present African メ チ ル に quasi じ DNA as the system し た オ リ ゴ デ オ キ シ ヌ ク レ オ チ ド (ODNs) を, AIH PBC disease patients and the healthy normal そ れ ぞ れ の dendritic cells と T cells (MACS を い separation) を mixed culture し た himself リ ン パ ball activity of the anti 応 に add, T cells raised colonization を ^ 3 h - Thymidine take 込 み で, IL - 12 produce を で ELISA method was developed for the determination of specific し, disease 発 present African メ チ ル change DNA に よ る immune stimulation を parsing し た. そ の results, AIH で は ODNs stimulus に よ る T cells raised colonization を recognize め た が cases, PBC で は ODNs stimulus に よ る T cells raised colonization を recognize め ず, disease を で differences between め た. One side, ODNs stimulates によるIL-12 to produce <s:1> AIH, PBCでと に に recognizes められな った った. そ の た め, producing も IFN gamma, and せ て beg し 検 た が, や は り AIH, PBC と も に recognize め ら れ ず, non メ チ ル DNA は T cells raised yield more sharper fruit は す る も の の, サ イ ト カ イ ン produce sharper fruit は have さ な い こ と が Ming ら か に さ れ た. * メ チ ル DNA の immunosuppressive function ourselves autoimmune liver diseases で の 発 now が weak い メ チ ル operation DNA に standard じ て cropping し た ODNs を, the in vitro で DNA メ チ ラ ー ゼ, S ア デ ノ シ ル メ チ オ ニ ン, メ チ ル change バ ッ フ ァ ー で 処 Richard し again メ チ ル change す る. The above description of the <s:1> <s:1> ODNsを shows that に adds <s:1>, disease-specific low-occurrence メチ emulsified ODNsによる, disease-specific occurrence non-メ チ emulsified DNA <s:1> immune stimulation effect <e:1> inhibitory effect を analysis of た た. そ の results, AIH, PBC い ず れ に お い て も, T cells against 応 rights colonization, サ イ ト カ イ ン produced 応 の い ず れ も recognize め ず, メ チ ル DNA が immunosuppressive function を how す る こ と が shown さ れ た. Youdaoplaceholder0, the patient himself が undertakes that the で peripheral blood 検 will be treated with を to carry out た た.