自己免疫性肝疾患の病態に関わる非メチル化DNA発現プロファイルのゲノムワイド解析

点击翻译按钮获取中文摘要

§疾患特異的メチル化・非メチル化DNAの免疫調節作用の検討*非メチル化DNAの免疫刺激機能疾患特異的発現非メチル化DNAに準じ作製したオリゴデオキシヌクレオチド(ODNs)を、AIH・PBC症例、健常人それぞれの樹状細胞とT細胞(MACSを用い分離)を混合培養した自己リンパ球活性化反応系に添加、T細胞増殖を^3H-Thymidine取込み法で、IL-12産生をELISA法で測定し、疾患特異的発現非メチル化DNAによる免疫刺激作用を解析した。その結果、AIH症例ではODNs刺激によるT細胞増殖を認めたが、PBC症例ではODNs刺激によるT細胞増殖を認めず、疾患間で差異を認めた。一方、ODNs刺激によるIL-12産生はAIH、PBCでともに認められなかった。そのため、IFNγ産生も併せて検討したが、やはりAIH、PBCともに認められず、非メチル化DNAはT細胞増殖促進効果は有するものの、サイトカイン産生効果は有さないことが明らかにされた。*メチル化DNAの免疫抑制機能自己免疫性肝疾患での発現が弱いメチル化DNAに準じて作製したODNsを、in vitroでDNAメチラーゼ、Sアデノシルメチオニン、メチル化バッファーで処理し再メチル化する。このODNsを上記実験系に添加し、疾患特異的低発現メチル化ODNsによる疾患特異的発現非メチル化DNAの免疫刺激作用の抑制効果を解析した。その結果、AIH、PBCいずれにおいても、T細胞増殖反応、サイトカイン産生反応のいずれも認めず、メチル化DNAが免疫抑制機能を有することが示された。なお、患者本人が承諾の上で末梢血検体採取を施行した。