転写因子PU.1による肺胞マクロファージへの分化調節機構の解明

转录因子PU.1调控肺泡巨噬细胞分化的机制阐明

• 批准号: 18790530
• 负责人: 阿部 修一
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Yamagata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790530/
• 关键词: 肺胞マクロファージ; 細胞分化; 転写因子; GM-CSF; PU.1; M-CSF; マクロファージ; 自然免疫

肺胞マクロファージの分化・活性化における転写因子PU.1の役割を明らかにするため、顆粒球・単球コロニー刺激因子(GM-CSF)ノックアウトマウス由来の肺胞マクロファージ細胞株(mAM)、およびマウスマクロファージ細胞株(RAW264.7)にPU.1 siRNAを安定的に発現させた培養細胞株(RAWsiPU.1)を研究に用いた。mAM細胞は細胞形態が円形から紡錘形に変化していた。蛍光ラテックスビーズを用いて貪食機能を検討したところ、mAM細胞では貪食機能の低下を認めた。また、mAMでは単球コロニー刺激因子(M-CSF)の遺伝子発現が亢進していたが、これはM-CSF遺伝子の転写活性の増加によるものであった。一方、RAW siPU.1細胞では、細胞の継代に伴いPU.1の発現が回復してきた。このため、再度PU.1をノックダウンするためRAW細胞へのPU.1 siRNAの遺伝子導入を再度行い、新たな安定発現細胞株を作成中である。すでに今回も蛋白発現レベルでのPU.1ノックダウンを確認しているため、引き続きreal time PCRにより種々の遺伝子発現を解析していく。現在はマクロファージから産生されるサイトカイン(例えばTNF-αやIL-1β、IL-6、IL-8、IL-10など)あるいはマクロファージの分化に重要な他の転写因子群(例えばICSBPやMafBなど)について、それぞれのPCRプライマーを作成した。さらに貪食機能やアポトーシスについても検討していく予定である。

Cell differentiation and activation of PU.1 gene expression in human lung cells, granulocyte macrophage stimulating factor (GM-CSF), cell line (mAM), cell line (RAW264.7), PU.1 gene expression in cultured cell line (RAWsiPU.1) were studied using siRNA. mAM cell morphology changes from round to spindle. The gluttony function of mAM cells is low. The expression of M-CSF gene was increased, and the activity of M-CSF gene was increased. A side, RAW siPU.1 cell, cell generation accompanied by PU.1 and recovery. The introduction of PU.1 siRNAs into RAW cells was carried out again, and new stable cell lines were established. The PU.1 gene was identified in the protein expression profile, and the protein expression profile was analyzed in real time PCR. Now, we are creating a set of factors (e.g. TNF-α, IL-1β, IL-6, IL-8, IL-10) that are important for the differentiation of genes (e.g. ICSBP, MafB). The gluttony function is set in the middle of the discussion

项目成果

A single nucleotide polymorphism in the CCL1 gene predicts acute exacerbations in chronic obstructive pulmonary disease

• DOI: 10.1164/rccm.200603-443oc
• 发表时间: 2006-10-15
• 期刊: AMERICAN JOURNAL OF RESPIRATORY AND CRITICAL CARE MEDICINE
• 影响因子: 24.7
• 作者: Takabatake, Noriaki;Shibata, Yoko;Kubota, Isao
• 通讯作者: Kubota, Isao

Increased surfactant protein-D and foamy macrophages in smoking-induced mouse emphysema

• DOI: 10.1111/j.1440-1843.2006.01009.x
• 发表时间: 2007-03-01
• 期刊: RESPIROLOGY
• 影响因子: 6.9
• 作者: Hirama, Noriyuki;Shibata, Yoko;Kubota, Isao
• 通讯作者: Kubota, Isao

Enhanced expression of MafB inhibits macrophage apoptosis induced by cigarette smoke exposure

• DOI: 10.1165/rcmb.2006-0248oc
• 发表时间: 2007-04-01
• 期刊: AMERICAN JOURNAL OF RESPIRATORY CELL AND MOLECULAR BIOLOGY
• 影响因子: 6.4
• 作者: Machiya, Jun-ichi;Shibata, Yoko;Kubota, Isao
• 通讯作者: Kubota, Isao

A nonfunctioning single nucleotide polymorphism in olfactory receptor gene family is associated with the forced expiratory volume in the first second/the forced vital capacity values of pulmonary function test in a Japanese population.

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2007.10.068
• 发表时间: 2007-12
• 期刊: Biochemical and biophysical research communications
• 影响因子: 3.1
• 作者: N. Takabatake;S. Toriyama;Y. Takeishi;Y. Shibata;T. Konta;S. Inoue;S. Abe;A. Igarashi;Yoshikane Tokairin;M. Ishii;Satoru Koyano;M. Emi;T. Kato;S. Kawata;I. Kubota

Enhanced immediate inflammatory response to Streptococcus pneumoniae in the lungs of mice with pulmonary emphysema

• DOI: 10.1111/j.1440-1843.2007.01229.x
• 发表时间: 2008-05
• 期刊: Respirology
• 影响因子: 6.9
• 作者: Yoshikane Tokairin;Y. Shibata;M. Sata;S. Abe;N. Takabatake;A. Igarashi;T. Ishikawa;S. Inoue;I. Kubota