イノシン特異的mRNA切断によるADAR1基質同定と遺伝性対側性色素異常症病態解明

通过肌苷特异性 mRNA 切割鉴定 ADAR1 底物并阐明遗传性​​对侧色素异常的发病机制

• 批准号: 18790784
• 负责人: 河野 通浩
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18790784/
• 关键词: RNA編集; 色素細胞; 角化細胞; ADAR1; チロシナーゼ; MART-1

前年度(H18年度)には、ADAR1遺伝子の発現ベクターを作製し、色素細胞および角化細胞に導入し、ADAR1を過剰発現させた。その際の色素関連遺伝子であるチロシナーゼおよびMART-1についての発現量の変化をmRNAレベルで調べたところ、有意な変化は見られなかった。本年度は、上記の結果をふまえて、(1)本研究で用いるイノシン特異的mRNA切断によるADAR1編集基質同定手法の検討および(2)正常色素細胞においてsiRNAを用いたADAR1遺伝子発現抑制を起こした際のDNAマイクロアレイを用いた包括的遺伝子発現変化の観察を進めた。(1)のイノシン特異的mRNA切断を行うためには、多くのステップについて予備実験による条件設定が必要である。本実験への準備を進めているが、いまだ本実験に進むための条件設定は進んでいない。(2)については、ADAR1遺伝子のsiRNAを設計して、遺伝子抑制させた時のチロシナーゼおよびMART-1についての発現量の変化をmRNAレベルで調べたところ、有意な変化は見られなかった。現在まで明らかになっていない、ADAR1遺伝子抑制によって影響を受ける遺伝子を明らかにするため、正常色素細胞及び角化細胞でADAR1を抑制させ、DNAマイクロアレイを用いて包括的遺伝子発現変化を観察した。遺伝子の発現の変化はいくつかの遺伝子で見られたため、現在、リアルタイムPCRを用いて、マイクロアレイで得られた結果の確認実験を進めている。また、我々のグループで継続的に行っている遺伝性対側性色素異常症患者のADAR1遺伝子変異の検索は続けて行っている。

In the previous year (H18), ADAR1 was produced, ADAR1 was produced, chromatophores were introduced into keratinocytes, and ADAR1 was passed.その记の色色综合狠子であるチロシナーゼおよびMART-1についての発Current amount of の変化をmRNAレベルで调べたところ, intentional な変化は见られなかった. This year, the above-mentioned results are as follows: (1) In this study, we used the specific mRNA cutting and ADAR1 editing matrix isotopic technique of ADAR1 in this study (2) Normal color Cellular siRNA is used to inhibit ADAR1 gene expression. The remaining DNA contained in the DNA of the world has been transformed into a new one. (1) It is necessary to set the conditions for specific mRNA cutting of のイノシンを行うためには and くのステップについて.本実験への ready to enter めているが, いまだ本実験に入むためのcondition setting は入んでいない. (2) については, ADAR1 siRNA design, siRNA inhibition, siRNA suppressionびMART-1についての発真人の変化をmRNAレベルで调べたところ, intentionalな変化は见られなかった. Now it's まで明らかになっていない, ADAR1 伝子 suppresses the influence of によって, affected by ける伝子を明らかにするため, normal color ADAR1 is inhibited in keratinocytes and keratinocytes, and the genes involved in DNA synthesis are now modified. The legacy of the legacy of the child You can use PCR to confirm the result of PCR using PCR or PCR.また、My 々のグループで継続's に行っている缝篾lateral dyschromatosis patient's のADAR1 伝子変differentの検SO は続けて行っている.

项目成果

特発性脳内石灰化症を合併した遺伝性対側性色素異常症の1例

遗传性对侧色素沉着障碍并发特发性脑内钙化一例

• 发表时间: 2007
• 作者: T. Suzuki;S. Ito;T. Kondo;Y. Tomita;坂井 香織;鈴木 民夫;河野 通浩;近藤 泰輔;鈴木 民夫;三橋 善比古;鈴木 民夫;三浦 歩;近藤 泰輔
• 通讯作者: 近藤 泰輔

新規遺伝子変異を認めた遺伝性対側性色素異常症の4例

新型基因突变遗传性对侧色素沉着障碍四例

• 发表时间: 2007
• 作者: T. Suzuki;S. Ito;T. Kondo;Y. Tomita;坂井 香織;鈴木 民夫;河野 通浩;近藤 泰輔
• 通讯作者: 近藤 泰輔