慢性脳虚血におけるオリゴデンドロサイトの動態、大脳白質病変発症抑制に関する研究

慢性脑缺血少突胶质细胞动力学及抑制脑白质病变发展的研究

• 批准号: 18791011
• 负责人: 小久保 安昭
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Yamagata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18791011/
• 关键词: 慢性脳虚血; オリゴデンドロサイト前駆細胞; 成熟オリゴデンドロサイト; ミエリン; 大脳白質病変; 認知機能低下; 脱髄; oligodendrocyte; demyelination; glial progenitor; 大脳白質; leukoaraiosis

SDラット(雄210-250g)を用いて永久両側総頚動脈結紮による慢性脳虚血モデルを作製し、術直後、術後2、4、6、8週において脳血流の測定を行った(n=6)。術後2、4、6、8週において灌流固定後に脳スライスを作成し抗NG2抗体(オリゴデンドロサイト前駆細胞(OPC)のマーカー)及び抗GST一π抗体(成熟オリゴデンドロサイト(OLG)のマーカー)を用いて免疫組織化学染色及び蛍光2重染色を行った(n=6)。術後4週目において、抗BrdU抗体(増殖細胞のマーカー)と抗NG2抗体を用いて蛍光2重染色を行った(nニ3)。術後4、6、8、12週において、抗MBP抗体(ミエリンのマーカー)を用いてウエスタンブロットを行った(n=6-7)。術後2、4、6、8、12週において水迷路試験により認知機能評価を行った(n=10-14)。術後1、3、5日及び1-8週目まで各週、ロータロッド試験により運動機能評価を行った(n=6)。脳血流の測定の結果、術直後に約50%の低下を示した後、回復傾向を示した。免疫染色の結果、NG2陽性細胞数は4週で有意に増加し(P〈0.05)、その後も増加傾向を示した。GST一π陽性細胞数は2週では有意に減少し(P〈0.05)、その後増加の傾向にあった。蛍光2重染色の結果、NG2陽性細胞とGST陽性細胞及びBrdU陽性細胞とのマージは増加傾向を示した。ウエスタンブロットの結果、MBPは有意に減少し6週で最低であった(P〈0.05)。水迷路試験の結果、成績が有意に低下し、6週が最低であった(P〈0.05)。ロータロッド試験の結果、明確な低下は見られなかった。以上より組織学的にOPCの増加及びOLGの減少後回復を認めOLGの再生が示唆されたが、ミエリンは減少を示した。また認知機能低下がミエリンと同様に残存していたことから、脱髄が認知機能障害に関与している可能性が示唆された。

SD (male 210g-250g) was used to measure the blood flow of chronic asthenia blood. The blood flow was determined by blood flow measurement (nude 6). After 2, 4, 6 and 8 days of perfusion, anti-NG2 antibodies (OPC cells) and anti-GST-π antibodies (mature cells) were detected by immunocytochemical staining and double staining (nude 6). After 4 weeks, anti-BrdU antibody, anti-NG2 antibody and anti-NG2 antibody were double stained with double staining (n = 3). 4, 6, 8, 12 days later, anti-MBP antibody (anti-HBV antibody) was used in the following days (nude 6-7). Then 2, 4, 6, 8, 12 hours later, the water maze was lost and the machine was aware that the machine was able to operate (nailed 10-14). After that, on the 1st, 3rd, 5th and 1st to 8th day, each train and train will be able to operate on the same day (n = 6). The results of blood flow measurement showed that about 50% of the blood flow was low after surgery, and the echocardiography showed that the blood flow was low after surgery. The results of immunostaining and the number of NG2 sexual cells were increased intentionally (P < 0. 05). The number of GST-π sex cells was less than that of the control group (P < 0. 05). The results of light 2 staining, NG2 sexual cells, GST sexual cells and BrdU sexual cells were detected. The results of MBP were significantly lower than those of the control group (P < 0. 05). The results of water labyrinth test, intentional low test, 6-year-old lowest score (P < 0.05). Please check the results and make sure that the results are clearly low. The addition of OPC and the reduction of OLG in the system above indicate that the regeneration of OLG is not good enough. It is known that the possibility that the machine can be disabled and the possibility that it can be disabled is also indicated by the possibility that it can be disabled.