妊婦末梢血中胎児有核赤血球を用いた無侵襲的な胎児遺伝子解析法の検討

利用孕妇外周血胎儿有核红细胞进行无创胎儿基因分析方法检查

• 批准号: 18791179
• 负责人: 松岡 隆
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Showa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18791179/
• 关键词: 有核赤血球; 出生前診断; ダウン症; 18トリソミー; 無侵襲; 母体血; FISH

母体血中に存在する有核赤血球を用いた胎児の遺伝子診断は、母体・胎児に無侵襲な理想的検査法である。我々は、レクチン法、自動有核赤血球識別装置、マイクロマニュピュレーション、FISH法を用い、母体血からの有核赤血球分離、解析法を確立し、その診断精度を検討する目的で行った。妊娠15週以降の羊水染色体検査を行う妊婦を対象に、同意を得た上で母体血14mLを採取した。母体血から有核赤血球を1.095g/mL比重遠沈法、レクチン法で濃縮し、自動有核赤血球識別装置で同定した後、Micromanipulation法で有核赤血球を単離し、X, Y染色体、及び21番染色体特異的プローブでFISH解析を行い、羊水検査の結果と比較した。その結果、80例の母体血で胎児性別を診断した。平均11.7mLの一母体血中から、中央値で10細胞(最大-最小:1-98)の有核赤血球が同定され、9細胞(1-22)でFISH診断した。性別診断の正診率は74/80(92.5%)で、偽陽性1例、偽陰性5例であった。男児診断の精度は、感度86.8%,陽性的中率97.1%であった。21番染色体の解析は、53例で終了し、羊水検査で21ートリソミーであった4例(7.6%)は、全例21-トリソミーと診断された。偽陽性、偽陰性はなく、21-トリソミーの正診率は100%であった。男児妊娠例(n=34)で、合計275細胞の有核赤血球のFISH解析が行われ、121細胞(44.0%)が、胎児由来であった。これらのことから、母体血中に存在する有核赤血球を用いて高い精度で胎児の染色体数の診断が可能なことが分かった。この研究を通じて無侵襲な胎児遺伝子診断法の精度が確認されれば、本法は臨床応用され、より安全な周産期医療の実現に寄与すると考えられる。

The ideal method for the presence of nucleated red blood cells in maternal blood is to use fetal blood, maternal fetal blood and maternal fetal blood. We detect, detect, automatic nucleated red blood cell identification device, automatic nucleated red blood cell identification device, FISH assay, maternal blood cell isolation, analytical identification, precision detection. After 15 years of pregnancy, the amniotic fluid chromosomes were collected, and the maternal blood 14mL was obtained with consent. In maternal blood samples, nucleated red blood cells 1.095g/mL specific gravity test, automatic nucleated red blood cell identification devices, Micromanipulation assay, X, Y chromosomes and chromosome 21 chromosome specific gravity FISH analysis were performed, and the results of amniotic fluid test were compared. The results showed that 80 cases of maternal blood had abnormal pregnancy. The average 11.7mL of 10 cells in maternal blood, 10 cells in central blood (max-min: 1-98) and 9-cell (1-22) FISH cells in nucleated red blood cells. The correct rate of sexual abnormalities was 74% (92.5%), 1 case of dysphagia and 5 cases of dysphagia. The accuracy and sensitivity of male sex were 86.8%, and the average rate of sex was 97.1%. Chromosome analysis was performed in 21 cases, amniotic fluid in 53 cases, amniotic fluid in 21 cases, amniotic fluid in 4 cases (7.6%), and in all cases. The positive rate is 100%. Male pregnancy (n = 34), FISH analysis of nucleated red blood cells (n = 275), fetal origin (n = 44.0%), fetal origin (n = 34) and fetal origin (n = 34). The presence of nucleated red blood cells in maternal blood and the presence of nucleated red blood cells in maternal blood may be separated by the use of high precision fetal DNA, chromosome number, chromosome number, chromosome number, The accuracy of this method is to confirm the accuracy of the method, to make sure that the bed is used, and to send it to the doctor during the weekly period of safety.