クルマエビの検疫関連遺伝子の機能解析

虎虾检疫相关基因的功能分析

• 批准号: 07F07439
• 负责人: 酒井 正博
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: University of Miyazaki
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07F07439/
• 关键词: クルマエビ; DNAワクチン; リゾチィーム; Rab7; クラスチン; ペナエジン; CpGオリゴヌクレオチド; 貪食能; リゾチーム活性; フローサイトメーター

エビ類における病原ウイルスの中でも、特に高い致死率をもつWhite Spot Syndrome Virus(WSSV)に対するワクチンの開発は世界各国で試みられている。しかしながら、ワクチン接種時のエビ体内での免疫応答メカニズムの解析は進んでおらず、ワクチン効果の判定は再現性の乏しい人工感染試験によるものがほとんどである。本研究では、DNAワクチン接種後のエビにおける自然免疫関連遺伝子の発現動態を解析することで、遺伝子レベルでのワクチン効果の判定を試みた。CMVをプロモーターにもつ発現ベクターにWSSVのエンベロープタンパク質:VP28をコードする遺伝子を挿入し、DNAワクチンを構築した。続いて、本ワクチンをクルマエビに接種し、WSSVによる攻撃試験によってワクチンの有効性を確認した。同時にワクチンの特異性を検討するために、Yellow head Virus(YHV)による攻撃試験を行った。さらに、ワクチン接種後に経時的にRab7,crustin,penaeidinおよびlysozyme遺伝子の発現解析を行った。ワクチン接種1週間後に攻撃試験を行った結果、コントロールと比べワクチン区の生残率は有意に高く(RPS69.9%)、ワクチンの効果が認められた。しかし、本効果はワクチン接種1ヶ月後には認められなかった。特異性については、ワクチン接種後WSSVまたはYHVで攻撃した区間において、生残率に有意な差は認められなかったが、WSSV攻撃区の生残率はYHV攻撃区に比べ高い傾向が見られた。ワクチン接種後の自然免疫遺伝子の発現は、接種後7日目において、コントロールと比べ顕著な発現量の増加が確認された。このことから、自然免疫遺伝子をDNAワクチンの効果の判定に利用できる可能性が示唆された。

エ ビ class に お け る pathogenic ウ イ ル ス の in で も, high に い lethality を も つ White Spot Syndrome Virus get (WSSV) に す seaborne る ワ ク チ ン の open 発 は world で try み ら れ て い る. し か し な が ら, ワ ク チ ン vaccination の エ ビ body で の immune 応 answer メ カ ニ ズ ム の parsing は into ん で お ら ず, ワ ク チ ン unseen fruit の determine は reproducibility の spent し い artificial infection test に よ る も の が ほ と ん ど で あ る. This study で は, DNA ワ ク チ ン vaccinated の エ ビ に お け る traces of natural immune masato even 伝 son の 発 now dynamic を す る こ と で, but 伝 レ ベ ル で の ワ ク チ ン unseen fruit の determine を try み た. CMV を プ ロ モ ー タ ー に も つ 発 now ベ ク タ ー に WSSV の エ ン ベ ロ ー プ タ ン パ ク mass: VP28 を コ ー ド す る posthumous son 伝 を scions into し, DNA ワ ク チ ン を build し た. 続 い て, this ワ ク チ ン を ク ル マ エ ビ に vaccination し, WSSV に よ る tapping shock test に よ っ て ワ ク チ ン の have sharper sex を confirm し た. At the same time に ワ ク チ ン の specificity を beg す 検 る た め に, Yellow head Virus get (YHV) に よ る against shock test line を っ た. さ ら に, ワ ク チ ン に after inoculation of 経 に Rab7, crustin, penaeidin お よ び lysozyme heritage 伝 son の 発 now line analytical を っ た. ワ ク チ ン vaccination に attack after 1 week between shock test line を っ た results, コ ン ト ロ ー ル と than べ ワ ク チ ン area の high birth rate of residual は intentionally に く (RPS69.9%), ワ ク チ ン の unseen fruit が recognize め ら れ た. <s:1> に った, the efficacy of this drug is チ ワ チ チ チ after 1ヶ month of vaccination に に recognize められな められな った った. Specificity に つ い て は, ワ ク チ ン vaccinated WSSV ま た は YHV で tapping shock し た interval に お い て, poor birth rate of residual に intentionally な は recognize め ら れ な か っ た が, WSSV tapping shock area の birth rate of residual は YHV tapping に shock area higher than べ い tendency が see ら れ た. ワ ク チ ン vaccinated の traces of natural immune 伝 son の 発 は, 7 orders after inoculation に お い て, コ ン ト ロ ー ル と than べ 顕 the な 発 now quantity の raised が confirm さ れ た. こ の こ と か ら, natural immune but 伝 を DNA ワ ク チ ン の unseen fruit の determine に using で き が る possibility in stopping さ れ た.

项目成果

Rapid and Sensitive Detection of Vibrio nigripulchritudo in shrimp by loop-mediated isothermal amplification method

环介导等温扩增法快速灵敏检测虾中黑弧菌

• 发表时间: 2008
• 作者: Fall;J.;Chakraborty;G.;Kono;T.;Maeda;M.;Itami;T.;Sakai;M.
• 通讯作者: M.

CpG-ODNはクルマエビの免疫を活性化するか

CpG-ODN 能激活虎虾的免疫力吗？

• 发表时间: 2008
• 作者: Fall;J.;Chakraborty;G.;Kono;T.;Maeda;M.;Itami;T.;Sakai;M.;チャクラボルティ グニマラ
• 通讯作者: チャクラボルティ グニマラ

Establishment of loop-mediated isothermal amplification method (LAMP) for the detection of Vibrio nigripulchritudo in shrimp

• DOI: 10.1111/j.1574-6968.2008.01332.x
• 发表时间: 2008-11-01
• 期刊: FEMS MICROBIOLOGY LETTERS
• 影响因子: 2.1
• 作者: Fall, Jean;Chakraborty, Gunimala;Sakai, Masahiro
• 通讯作者: Sakai, Masahiro