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魚類ミオシン重鎖遺伝子群の発現変動と筋分化の制御機構に関する研究

鱼类肌球蛋白重链基因表达变化及肌肉分化调控机制研究

基本信息

批准号：
07J04576
负责人：
小野陽介
金额：
$ 1.79万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2009
项目状态：
已结题

项目摘要

筋主要タンパク質ミオシンのサブユニットであるミオシン重鎖(MYH)はミオシンの生理機能に主体的な役割を果たすとともに、多くのアイソフォームが存在し、魚類の筋形成過程においても複数の遺伝子(MYH)が組織や発生段階によって異なる発現様式を示す。このことから、性質の異なる筋肉の形成にMYHの発現が密接に関与することが示唆される。本研究ではメダカの筋形成過程におけるMYHの転写調節機構の解析を通じて魚類筋肉の形成機構を明らかにすることを目的とした。昨年度までに、メダカ胚体型ミオシン重鎖遺伝子(MYHemb1)および仔魚型ミオシン重鎖遺伝子(MYHL1)の遺伝子上流配列と蛍光タンパク質遺伝子を結合した外来遺伝子を導入したトランスジェニック魚を作出し、MYHの組織特異的な発現が上流配列による転写調節に由来することを示した。今年度はこれらのトランスジェニック魚を用いて各MYHの発現とメダカ胚における筋分化機構との関連を調べた。MYHemb1の遺伝子上流1.9kbと緑色蛍光タンパク質(GFP)遺伝子を連結したコンストラクトは背側と腹側の筋肉を分割する水平筋隔部分で特異的に発現し、水平筋隔に局在する遅筋前駆細胞であるMuscle Pioneer細胞のマーカータンパク質engrailedと共局在を示した。さらにシクロパミン処理により遅筋分化の誘導因子であるヘッジホッグシグナルの阻害を行うとMYHemb1の発現が有意に減少することから、MYHemb1の発現が遅筋形成に関わることが示された。また、MYHemb1の発現低下と水平筋隔構造の消失が同時に観察されることから、MYHemb1が水平筋隔の形成に関与することが示唆された。一方、MYHL1の遺伝子上流2.6kbと赤色蛍光タンパク質(RFP)遺伝子を連結したコンストラクトは胚体の筋節全体で発現し、成魚では速筋に特異的に発現が観察された。また、ヘッジホッグシグナルを阻害してもMYHL1の発現は影響を受けないことから、MYHL1の発現はMYHemb1とは異なり速筋の形成に閧与することが示された。以上の研究成果は、魚類の筋形成における筋肉タンパク質の発現制御機構の解明に寄与するものである。

This paper describes the expression of MYH in the process of tendon formation and tissue development. The development of MYH is closely related to the formation of muscle with different properties. The purpose of this study is to analyze the mechanism of muscle formation in fish. In the past year, MYHb1 and MYHL1 have been shown to be involved in the regulation of the upstream alignment of genes and the binding of foreign genes to the upstream alignment of genes. This year, the development of MYH and the relationship between MYH and MYH are discussed. MYHemb1 gene upstream 1.9kb green fluorescent protein (GFP) gene linkage between the dorsal and ventral Muscle segments of the horizontal muscle compartment specific to the occurrence of horizontal muscle compartment in the anterior muscle cells of the muscle Pioneer cells of the muscle compartment of the mass engrailed in a total of these results. The expression of MYHemb1 is related to the induction of tendon differentiation. MYHemb1 is the key to the formation of horizontal ribs. In one case, MYHL1 gene upstream 2.6kb and red fluorescent protein (RFP) gene link were detected in all the embryonic tendons, and the specific development of adult fish was observed. MYHL1's occurrence is affected by the occurrence of MYHL1 and the occurrence of MYHL1's occurrence is affected by the occurrence of MYHL1's occurrence. The above research results are helpful for understanding the mechanism of muscle formation and quality development in fish.