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無顎類ゲノム情報を利用した魚類ミオシン重鎖遺伝子の解析

利用无颌基因组信息分析鱼类肌球蛋白重链基因

基本信息

批准号：
20880026
负责人：
池田大介
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Kitasato University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (Start-up)
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20880026/
关键词：
ヤツメウナギミオシン重鎖転写調節

项目摘要

1.ヤツメウナギミオシン重鎖遺伝子の網羅的解析ウミヤツメのゲノム情報を使用し、網羅的なミオシン重鎖遺伝子のin silicoクローニングを行った。その結果、ウミヤツメには少なくとも速筋型3種類、遅筋/心筋型3種類のミオシン重鎖遺伝子が存在していることがわかった。このうち、速筋型3種類および遅筋/心筋型2種類については、カワヤツメのゲノムにおける存在をPCR法により確認した。2.ヤツメウナギミオシン重鎖遺伝子クラスターの解析ウミヤツメゲノムデータベースを独自に解析した結果、3種の速筋型ミオシン重鎖遺伝子は、MYH2-MYHx-MYH1の順にタンデムクラスターを形成していた。また、ゲノムDNAを鋳型として用いたロングPCR法によって、カワヤツメにおける同ミオシン重鎖遺伝子クラスターの存在を確認した。3.脊椎動物に共通する筋発生機構の解析カワヤツメミオシン重鎖遺伝子の上流領域5〜6kbを、蛍光タンパク質遺伝子GFPあるいはRFPを含むレポーターベクターにクローニングした。速筋型3種類および遅筋/心筋型1種類、合計4種類のレポーターベクターを作製した。このうち、速筋型3種類のレポーターベクターをゼブラフィッシュ受精卵に顕微注入し、胚での発現を観察した結果、MYH1およびMYH2においては速筋での発現が確認できた。これより、無顎類のミオシン重鎖遺伝子プロモータは真骨魚で正しく認識されることが明らかとなった。

1. The analysis of the network of re-lock messages is carried out by using the information of the network of re-lock messages in silico. As a result, there are three kinds of double-locked genes in the three kinds of fast muscle type, and the three kinds of double-locked genes in the three kinds of muscle type 3 kinds of fast muscle type, 2 kinds of muscle type, PCR method 2. The analysis results of three kinds of fast muscle type relock vectors and MYH2-MYHx-MYH1 sequence are obtained by analyzing the relock vectors independently. To confirm the existence of DNA fragments by PCR. 3. Analysis of vertebrate common tendon development mechanisms 5 ~ 6kb upstream, upstream, downstream, downstream, 3 types of speed rib type 1 type of heart rib type, 4 types of heart rib type The results of microinjection and embryo development of MYH1 and MYH2 are confirmed. This is the first time I've ever seen a woman who's been in a relationship with a man.