2光子励起マーキングによる染色体形態構築ダイナミズムの研究

双光子激发标记染色体形态构建动力学研究

• 批准号: 18687005
• 负责人: 松永 幸大
• 金额: $ 16.22万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (A)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18687005/
• 关键词: 染色体; 顕微鏡; タンパク質; 光変換タンパク質; 2光子励起; 染色体形態; 染色体構造

平成19年度は、ヒト子宮頸ガン細胞HeLaとタバコ培養細胞BY-2を研究材料に用いて、2光子励起マーキングによる染色体形態構築ダイナミズムの研究を実施した。その結果、染色体形態構築メカニズムに関与する染色体タンパク質の動態をライブセルイメージングにより明らかにした。特に、ヌクレオリン、H1X、ASURA、フィブリラリンの4種類の染色体周縁タンパク質がヒト染色体の染色体形態構築ダイナミズムに関与することを明らかにしたことは意義深い。また、RNAi法によりタンパク質発現をノックダウンした細胞の染色体ダイナミズムを詳細に比較解析することが出来た点は、大きな成果となり、染色体形態構築メカニズムの一端を明らかにすることが出来た。これらのタンパク質の解析結果をRNAi法や免疫染色法による機能解析結果と合わせて、Journal of Cell Science、FEBS Letters,Current Biology,BBRCに掲載して国際的に高い評価を得た。また、染色体形態構築ダイナミズムに関与する植物オーロラキナーゼの機能解析をライブセルイメージングで進めた。染色体動原体タンパク質CENP-AとピストンH2Bを異なる蛍光タンパク質でマーキングした細胞ラインを構築して詳細に動態解析を実施した。特に、オーロラキナーゼのATP結合部位に特異的に結合して活性を低下させる薬剤ヘスペラジンを使用した機能解析は成果を挙げることができた。その結果、植物オーロラキナーゼは、染色体整列、染色体分配などに関与していることを明らかにした。以上の結果により、本課題の研究目的を達成して、染色体形態構築ダイナミズムをタンパク質の機能から明らかにする研究成果を得ることができた。

Pp.47-53 19th annual は, ヒ ト cervix ガ ン HeLa cells と タ バ コ cultured cells BY - 2 を に research materials with い て, two photon excitation マ ー キ ン グ に よ る chromosome form construct ダ イ ナ ミ ズ ム の research を be applied し た. そ の results, chromosome form construct メ カ ニ ズ ム に masato and す る chromosome タ ン パ ク qualitative の dynamic を ラ イ ブ セ ル イ メ ー ジ ン グ に よ り Ming ら か に し た. に, ヌ ク レ オ リ ン, H1X, ASURA, フ ィ ブ リ ラ リ ン の four kinds の chromosome weeks try タ ン パ ク qualitative が ヒ ト の chromosome form construct ダ イ ナ ミ ズ ム に masato and す る こ と を Ming ら か に し た こ と は い deep meaning. ま た, RNAi に よ り タ ン パ ク qualitative 発 now を ノ ッ ク ダ ウ ン し の た cell chromosome ダ イ ナ ミ ズ ム を に comparative analytic す る こ と が は た point, big き な results と な り, chromosome form construct メ カ ニ ズ ム の end を Ming ら か に す る こ と が た. こ れ ら の タ ン パ ク qualitative analytical results を の RNAi method や immune staining に よ る function analytical result と わ せ て, Journal of Cell Science, FEBS Letters, Current Biology, BBRC に first white jasmines load し て international に high い review 価 を た. ま た, chromosome form construct ダ イ ナ ミ ズ ム に masato and す る plant オ ー ロ ラ キ ナ ー ゼ の function analytical を ラ イ ブ セ ル イ メ ー ジ ン グ で into め た. Chromosomes agents タ ン パ ク qualitative CENP - A と ピ ス ト ン H2B を different な る 蛍 light タ ン パ ク qualitative で マ ー キ ン グ し た cells ラ イ ン を build し て に detailed dynamic analytic を be applied し た. に, オ ー ロ ラ キ ナ ー ゼ の ATP binding site に specific に combining し て active low を さ せ る 薬 tonic ヘ ス ペ ラ ジ ン を use し た function analytical は results を 挙 げ る こ と が で き た. そ の results, plant オ ー ロ ラ キ ナ ー ゼ は, chromosome distribution of the whole column, chromosome な ど に masato and し て い る こ と を Ming ら か に し た. の above results に よ り, this topic research purpose を の し て, chromosome form construct ダ イ ナ ミ ズ ム を タ ン パ ク qualitative の function か ら Ming ら か に す る research を must る こ と が で き た.

项目成果

Development of a multistage classifier for a monitoring system of cell activity based on imaging of chromosomal dynamics

• DOI: 10.1002/cyto.a.20378
• 发表时间: 2007-05-01
• 期刊: CYTOMETRY PART A
• 影响因子: 3.7
• 作者: Gambe, Arni E.;Ono, Rika Maniwa;Fukui, Kiichi
• 通讯作者: Fukui, Kiichi

The Arabidopsis SDG4 contributes to the regulation of ollen tube growth by methylation of histone H3 lysines 4 and 36 in mature pollen.

拟南芥 SDG4 通过成熟花粉中组蛋白 H3 赖氨酸 4 和 36 的甲基化来调节花粉管生长。

• 发表时间: 2008
• 期刊: Developmental Biology 315(印刷中)
• 作者: Cartagena JA;et. al.
• 通讯作者: et. al.

植物Auroraキナーゼ阻害による体細胞分裂の染色体動態変化

由于植物极光激酶抑制导致体细胞分裂过程中染色体动力学的变化

• 发表时间: 2008
• 作者: 松永幸大;栗原大輔;内山進;福井希一
• 通讯作者: 福井希一

植物Auroraキナーゼの染色体動態における機能解析

植物极光激酶在染色体动力学中的功能分析

• 发表时间: 2007
• 作者: 松永幸大;栗原大輔;内山進;福井希一
• 通讯作者: 福井希一

超短パルス光を用いた細胞内ナノサージェリー

使用超短脉冲光的细胞内纳米手术

• 发表时间: 2007
• 期刊: レーザー研究 35
• 作者: 渡辺歴;松永幸大ら
• 通讯作者: 松永幸大ら