ノックアウトマウスを用いた生体内におけるマイクロRNAの機能解析

使用基因敲除小鼠进行体内 microRNA 功能分析

• 批准号: 18700397
• 负责人: 蓮輪 英毅
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18700397/
• 关键词: miRNA; ノックアウトマウス

本研究は、動物個体レベルでのmiRNAの機能を明らかにするために、miRNAノックアウトマウスを作製し解析することを目的して研究を遂行した。マイクロRNAの個体レベルにおける役割を調べるためにmiR-200bを選び、ES細胞を用いた相同組み換え法によりノックアウトマウスを作製した。その結果、miR-200bをノックアウトしたマウスは見かけ上健康であったが、雌が不妊傾向を示した。この原因を探ったところ、下垂体の機能異常による排卵不全であることが示唆された。そこで下垂体前葉から分泌される排卵ホルモンであるLH-b、FSH-bの発現をリアルタイムPCRで定量したところ、発現量が減少していることを見いだした。さらに卵巣の組織学的な形態を調べたところ、LH-bやFSH-bのノックアウトマウスと同様に黄体形成が見られなくなるなどの異常があることがわかった。これらのことから、miR-200bは下垂体前葉における排卵ホルモンのレベルを正常域に調節していることが示唆された。マイクロRNAノックアウトマウスに見られる不妊の表現型がmiR-200bを欠損させたことに直接起因していることを確かめるために、全身でmiR-200bを発現するトランスジェニックマウスを作製し、表現型のレスキュー実験を行った。その結果、miR-200bをノックアウトしてもかわりにmiR-200bトランスジーンをもつマウスでは不妊の表現型が回復したことから、不妊の表現型はmiR-200b欠損そのものにより引き起こされていることを証明することができた。これらの研究成果により、miR-200bは動物が繁殖し種を保存するという生命現象の中でも最も重要な働きにかかわるmiRNAであることを明らかにした。

This study aims to clarify the function of miRNA in individual animals. MiRs-200b are selected from the same group of cells. As a result, miR-200b can be seen as unhealthy and has a tendency to be infertile. The reason for this is that the pituitary function is abnormal, and the ovulation is incomplete. The amount of LH-b and FSH-b secreted by the anterior lobe of the pituitary gland was reduced by PCR. In addition, the histological morphology of the egg is modulated, LH-b, FSH-b and corpus luteum formation is abnormal. MiRs-200b are regulated in the normal domain of the anterior lobe of the pituitary gland The expression of miR-200b in the whole body is controlled by the expression of miR-200b in the phenotype. As a result, miR-200b can be found in the phenotype of miR-200b, which can be found in the phenotype of miR-200b. MiRs-200b are the most important biological phenomena in animal reproduction.

项目成果

遺伝子ノックアウト法により見えてきたmiRNAが寄与する生命現象

基因敲除法揭示miRNA促成的生命现象

• 发表时间: 2007
• 作者: F.Guo;et al.;小林誠;C.wang;C.wang;H. Kawamichi;S. Kobayashi;H. Kishi;D. Xu;K. Kajiya;郭鳳玲;加治屋勝子;川道徳津美;H. Kawamichi;小林誠;岸博子;Hiroko Kishi;加治屋勝子;岸博子;蓮輪英毅
• 通讯作者: 蓮輪英毅