タンパク質の凝集や失活をふせぐ溶液デザイン法の確立

建立防止蛋白质聚集和失活的溶液设计方法

• 批准号: 18750140
• 负责人: 白木 賢太郎
• 金额: $ 2.43万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-18750140/
• 关键词: タンパク質凝集; タンパク質フォールディング; タンパク質溶液; 酸化的リフォールディング; リゾチーム; アミノ酸誘導体; アルギニン; 凝集抑制剤; タンパク質溶液デザイン; ニワトリリゾチーム; アルギニンアミド

本研究では溶液に添加する低分子化合物をデザインすることで、タンパク質の熱による凝集の抑制や、リフォールディングにともなう凝集の抑制する方法を試みた。リゾチームを対象に調べたところ、熱にともなう凝集の抑制に最良の添加剤はアミノ酸アルキルエステルやポリアミンだった。本研究ではあらたにアミノ酸アミドを見いだした。効果はアミノ酸アルキルエステルと同等だが、加水分解をうけにくいために応用範囲が広がる。またポリエチレングリコールを加えておくと、アルギニンやアミノ酸誘導体の凝集抑制能が相乗的に増加することを見いだした。リフォールディングにともなう凝集と熱にともなう凝集にたいして効果のある化合物を網羅的に探索した。その結果、前者にはウレイド基やグアニジウム基を持つ化合物が、後者にはアミノ酸の主鎖骨格を持つ化合物が候補にあがった。タンパク質の熱凝集という速度論的な過程は、平衡論的な溶解度という概念で記述できることがわかった。ホフマイスター系列中、溶解度を低下させるタイプの塩は、タンパク質凝集速度を増加させる相関がみられたが、アンモニウム塩は例外的に凝集を高度に抑制した。タンパク質溶液には、経験的に塩化ナトリウムなどの塩を添加することが多いが、凝集を抑制するというデザインを考えるならモル表面張力増加率の低いカチオンとアンモニウムイオンを組み合わせた塩(例えばチオシアン酸アンモニウムやヨウ化アンモニウム)が好ましいことを意味する。

This study で は solution に add す る low molecular compound を デ ザ イ ン す る こ と で, タ ン パ ク qualitative の hot に よ る agglutination の や, リ フ ォ ー ル デ ィ ン グ に と も な う agglutination の inhibit す る method を try み た. リ ゾ チ ー ム を like に seaborne adjustable べ た と こ ろ, hot に と も な う agglutination の inhibit に most good の add tonic は ア ミ ノ acid ア ル キ ル エ ス テ ル や ポ リ ア ミ ン だ っ た. For this study, で あらたにア あらたにア ノ ノ acid ア ドを ドを can be found in だ だ た た. Unseen fruit は ア ミ ノ acid ア ル キ ル エ ス テ ル と equal だ が, hydrolytic decomposition を う け に く い た め に 応 with van 囲 が hiroo が る. ま た ポ リ エ チ レ ン グ リ コ ー ル を plus え て お く と, ア ル ギ ニ ン や ア ミ ノ acid induced body の agglutination inhibition can 乗 に raised and が す る こ と を see い だ し た. リ フ ォ ー ル デ ィ ン グ に と も な う agglutination と hot に と も な う agglutination に た い し て unseen fruit の あ る compound を snare に explore し た. そ の results, the former に は ウ レ イ ド base や グ ア ニ ジ ウ ム が を hold つ compounds, and the latter に は ア ミ ノ acid の collarbone, Lord を hold つ compound が alternate に あ が っ た. タ ン パ ク qualitative の heat agglutination と い な process は う speed theory, equilibrium theory of な solubility と い う concept で account で き る こ と が わ か っ た. ホ フ マ イ ス タ ー series, the low solubility を さ せ る タ イ プ の salt は, タ ン パ ク qualitative agglutination speed を raised さ せ る phase masato が み ら れ た が, ア ン モ ニ ウ ム salt は exceptions に agglutination を highly に inhibit し た. タ ン パ ク qualitative solution に は, 経 験 に of salt chemical ナ ト リ ウ ム な ど の salt を add す る こ と が more い が, agglutinate を suppression す る と い う デ ザ イ ン を exam え る な ら モ ル rights and rate の low surface tension い カ チ オ ン と ア ン モ ニ ウ ム イ オ ン を group み close わ せ た salt (example え ば チ オ シ ア ン acid ア ン モ ニ ウ ム や ヨ ウ change ア ン モ ニ ウ ム) が well Youdaoplaceholder0 ま ま とを とを とを means する.

项目成果

タンパク質のリフォールディング添加剤及びそれを用いたタンパク質の再生方法

蛋白质重折叠添加剂及使用其的蛋白质再生方法

• 发表时间: 2006

蛋白質を含む液状組成物中における蛋白質の安定化方法

用于稳定含有蛋白质的液体组合物中的蛋白质的方法

• 发表时间: 2007

タンパク質凝集抑制剤の構造

蛋白质聚集抑制剂的结构

• 发表时间: 2006
• 期刊: 生物工学 84
• 作者: 白木 賢太郎;平野 篤;浜田 寛之
• 通讯作者: 浜田 寛之

リゾチームの熱凝集と溶液の表面張カの関係

溶菌酶的热聚集与溶液表面张力的关系

• 发表时间: 2007
• 作者: 白木 賢太郎;平野 篤;浜田 寛之;平野篤・浜田寛之・白木賢太郎
• 通讯作者: 平野篤・浜田寛之・白木賢太郎