权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

Molecular dissection of interferon-resistance in oral squamous cell carcinoma

口腔鳞状细胞癌干扰素抵抗的分子解析

基本信息

批准号：
19791371
负责人：
SEKINE Keisuke
金额：
$ 2.34万
依托单位：
Meikai University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19791371/
关键词：
インターフェロンγ 口腔癌細胞細胞増殖 Cell cycle Cell cvcle

项目摘要

本研究課題についてHSC-2細胞においてIFNγによりCyclin A2、 Cdk2以外にもCdk1、Cdk4の発現が抑制されることを見出した。複数の細胞周期関連遺伝子の発現がIFNγにより抑制されることが明らかとなったことから、本年度はこれら細胞周期関連遺伝子を個別に発現抑制しているのではなく、これら遺伝子の上流に位置する細胞周期制御のマスターレギュレーターがIFNγにより調節されている可能性を考えp53およびRBについて検討した。p53は口腔扁平上皮癌において高頻度に変異が見られることが知られており、HSC-2、Ca9-22においてもp53の変異が知られている。Ca9-22でのp53の変異は優勢抑制型変異でありタンパク質が分解されず過剰に存在していた。一方、HSC-2では変異によりタンパク質レベルで検出できなかった。そこで、Ca9-22型p53をレンチウイルスを用いてHSC-2細胞に発現するとCa9-22型p53はHSC-2細胞においても安定で過剰に発現が見られた。この過剰発現細胞にIFNγ処理すると、野生型HSC-2細胞と同様にCyclin A2, Cdk2の発現抑制が見られた。次にRB について検討するとHSC-2ではIFNγによりRb の活性化状態であるリン酸化抑制状態になることが明らかとなり、一方Ca9-22ではこのようなリン酸化抑制は見られなかった。そこでこのようなIFNγにより活性化されたRBが実際に細胞周期関連遺伝子の発現に関与するか調べるためSV40large T抗原のRB結合部位(T-rb)をレンチウイルスにより発現し、RBの作用を阻害した。するとT-rb発現HSC-2ではIFNγによるCyclinA2, Cdk2等の発現抑制が解除された。以上、本研究課題によりCa9-22型変異p53 の優勢抑制作用がCa9-22におけるIFNγ抵抗性の原因ではないことが初めて明らにし、IFNγはRB を活性化(リン酸化抑制)することで複数の細胞周期関連遺伝子の発現を抑制することが明らかとなった。またCa9-22でのIFNγ抵抗性はIFNγのRB活性化(リン酸化抑制)に何らかの異常があるためであることが明らかになった。

This study was conducted to investigate the inhibition of IFNγ expression in HSC-2 cells except for Cyclin A2 and Cdk2, Cdk1 and Cdk4. This year, the expression of multiple cell-cycle-related genes was individually inhibited by IFNγ. The possibility of regulating the expression of multiple cell-cycle-related genes by IFNγ was examined by p53. p53 and oral squamous cell carcinoma are highly frequent and variable. Ca9 -22 p53 variant is dominant and inhibitory variant. A square, HSC-2, is different from the original. Ca9 - 22 type p53 gene expression in HSC-2 cells was observed in the same way as Ca9 -22 type p53 gene expression in HSC-2 cells. IFNγ treatment in these cells inhibited the expression of Cyclin A2 and Cdk2 in wild-type HSC-2 cells. In addition, HSC-2 is in the active state of IFNγ, Rb is in the acidic state, and Ca9 -22 is in the acidic state. The activation of IFNγ is associated with the development of cell cycle-related genes and the regulation of the RB-binding site (T-rb) of SV40 large T antigen. T-rb expression of HSC-2, IFNγ, CyclinA2, Cdk2 and other expression inhibition was released. As described above, the subject of this study is to investigate the dominant inhibitory effect of Ca9 - 22 variant p53 on IFNγ resistance to Ca9 -22, and to investigate the mechanism of inhibition of the production of multiple cell-cycle-related genes by inhibiting the activation of IFNγ and RB. Ca9 -22 IFNγ resistance IFN γ RB activation (acidification inhibition)