Detection of intestinal adaptation enhancing agents by induction of nitric oxide in small bowel transplantation

小肠移植中一氧化氮诱导检测肠道适应增强剂

• 批准号: 19592066
• 负责人: HAMADA Yoshinori
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Kansai Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19592066/
• 关键词: 小腸移植; 上皮成長因子; 一酸化窒素; 虚血再還流障害

1)In vitro系(ラット小腸上皮細胞、IEC-6)を用いて、スタチンの誘導型一酸化窒素合成酵素(inducible nitric oxide synthase, iNOS)誘導への効果を検討した。その結果、IEC-6にIL-1βあるいはpitavastatinを単独で添加しても一酸化窒素(NO)産生は認められないが、両者を同時投与することによりNO産生が増強された。また同時投与によりiNOS proteinおよびmRNAレベルも同様に増加を示した。pitavastatinはさらにIL-1βと上皮成長因子(epidermal growth factor, EGF)の相乗効果によるNO産生に対しても強い増強効果を示した。この効果はメバロン酸によりブロックされた。さらに、pitavastatinはin vitro系(ラット初代培養肝細胞)を用いたiNOS誘導への効果においても、IEC-6と同様にIL-1βのiNOS誘導を転写レベルと転写後調節の両段階を介して促進した。特に後者の転写後調節ではiNOS mRNAの安定化に関与するiNOS遺伝子のアンチセンス転写物の発現を増加させた。また同様の効果が抗潰瘍剤rebamipideでも認められた。2)小腸移植後の腸管機能の回復とiNOSとの関係を明確にするために、ラット小腸の虚血・再灌流(ischemia-reperfusion, IR)モデルを用いて、組織障害の回復過程におけるiNOS の発現誘導を解析した。IRモデルはラット(雄性、Sprague-Dawly, 8週齢;250-300g)の小腸虚血(上腸間膜動脈45分clamp)を作製し、再灌流後経時的(1-6時間)に回腸を摘出した。虚血直後は絨毛先端の粘膜上皮細胞の剥脱が顕著であったが、再灌流1時間で剥脱部位への上皮細胞の移動が認められた。再灌流3-6時間では絨毛先端の回復を示した。回腸の粘膜部分を採集し、RT-PCR法に従ってRNA 抽出を行いiNOS mRNAを測定し、equal loadingの指標としてelongation factor 1αを解析した。虚血45分のラットではiNOS mRNAレベルの増加傾向がみとめられたが、sham control(開腹してclampなし)のiNOS mRNA basalレベルはラットの個体ごとに大きく変動した。

1)In vitro lines (ラット small intestinal epithelial cells, IEC-6)を induced へ <s:1> effect を検 of を検 and スタチ <s:1> inducible nitric oxide synthase (iNOS) を検 to obtain た. そ の results, IEC - 6 に IL - 1 beta あ る い は pitavastatin を 単 で alone add し て も a acidification smothering element (NO) produced は recognize め ら れ な い が, struck を cast and す る こ と に よ り NO が raised strong さ れ た. Youdaoplaceholder0 was simultaneously injected with によ によ iNOS proteinおよびmRNAレベ レベ また in the same way に increased を showed を た. pitavastatin さらに さらにIL-1βと the <s:1> effect of epidermal growth factor (EGF) によるNO produces a に strong <s:1> enhancing effect on <s:1> て 乗 を indicating た. The effect of メバロ によ acid によ によ ブロッ された された. さ ら に, pitavastatin は the in vitro system (ラ ッ ト generation develop liver cells) in the early を with い た induced iNOS へ の unseen fruit に お い て も, IEC - 6 と with others に IL - 1 beta の induced iNOS を planning write レ ベ ル と planning to write after adjusting の struck Duan Jie を interface し て promote し た. Special に latter の planning to write after adjusting で は iNOS mRNA の stabilization に masato and す る traces of iNOS 伝 son の ア ン チ セ ン ス planning about の 発 now を raised さ せ た. Youdaoplaceholder0 has the same effect as the が antiulcerative rebamipideで められた. 2) function of small intestine transplantation の insufflate の reply と iNOS と の masato is を clear に す る た め に, ラ ッ ト small intestine の deficiency, blood perfusion again, ischemia - reperfusion (IR) モ デ ル を with い て, organization handicap of の reply process に お け る iNOS の 発 now induced を parsing し た. IRモデ た ラット ラット ラット(male, Sprague-Dawly, 8 weeks 齢;250-300g) intestinal small intestinal hypoemia (45 minutes of upper enteric intermembrane artery clamp)を for making モデ, reperfusion, and after time (1-6 time)に ileum を to extract た. Virtual blood straight は villi apex の mucosa epithelial cells after の stripped が 顕 the で あ っ た が, 1 time again perfusion で parts peeling へ の の mobile が epithelial cells to recognize め ら れ た. After re-perfusion for 3 to 6 times, で で the villous apex patus returned to を, indicating た. Youdaoplaceholder0 collection of <s:1> from the ileal <s:1> mucosa, に従ってRNA extraction by RT-PCR, を determination of <s:1> iNOS mRNAを, equal loading <s:1> index と て てelongation factor 1αを analysis of た た. Virtual blood 45 の ラ ッ ト で は iNOS mRNA レ ベ ル の rights and tendency が み と め ら れ た が, sham control (open し て clamp な し) の iNOS mRNA basal hominins レ ベ ル は ラ ッ ト の individual ご と に big き く - move し た.

项目成果

Pitavastatin up-regulates the induction of iNOS through enhanced stabilization of its mRNA in pro-inflammatory cytokine-stimulated hepatocytes

• DOI: 10.1016/j.niox.2007.08.005
• 发表时间: 2008-02-01
• 期刊: NITRIC OXIDE-BIOLOGY AND CHEMISTRY
• 影响因子: 3.9
• 作者: Habara, Kozo;Hamada, Yoshinori;Okumura, Tadayoshi
• 通讯作者: Okumura, Tadayoshi