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RNA干渉を用いたインビボ神経節遺伝子発現ノックダウン法の臨床応用可能性の検証

利用RNA干扰验证体内神经节基因表达敲低方法的临床适用性

基本信息

批准号：
19650095
负责人：
加藤総夫
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Jikei University School of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2009
项目状态：
已结题

项目摘要

In vivo神経節gene silencing法の方法を昨年度までに確立した。同方法を応用し、内臓由来一次求心線維の脳内終末に発現すると予想されているP2X3サブユニット分子(p2x3r)をノックダウンしたところ、導入11-15日後、孤束核におけるP2X3サブユニットタンパクの発現はsiRNA導入側特異的にほぼ半減した。ATPおよびα,β-methylene ATPの効果を定量的に評価したところ、siRNA導入によってα,β-methylene ATPの作用が約45%まで著明にかつ有意に減少した。脱感作の遅いP2X2/3ヘテロ受容体型の応答がP2X2ホモ受容体型に変化した可能性が強く支持された。本年度は、以上の成果を公表するための論文作成に必要となる追加実験を主に行った。残念ながら、本報告書の執筆時点では投稿論文受理に至っていないが、速やかに公開し、この方法を広くさまざまな分子に応用すべく、見学者を広く受け入れ、技術の公開に務めた。また、両側性の電気穿孔法も、体重の減少、行動上の異常などの問題なく行うことが可能となり、in vivoへの応用も可能であることが示された。一方、新たな問題点として、迷走神経求心路の発現分子特性の左右差が予想以上に大きいこと、一次求心神経終末発現分子と類似のしかし薬理学的性質の異なる分子が脳内に発現しており、そのノックダウンの効果が予想以上に単純ではないこと、などの新たな知見が得られたため、本技術を公開した後に新たに取り組む必要がある。

The In Vivo Gene Silencing Method was established last year. The same method is used to find the inner terminal of the heart line dimension.ンしたところ, after 11-15 days of introduction, solitary tract nucleus におけるP2X3 サブユニットタンパクの発 is now a siRNA introduction side-specific にほぼhalf-reduced した. The effects of ATP and β-methylene ATP are quantitatively evaluated, and the effect of siRNA introduction is about 45% and the effect of ATP is reduced intentionally. The desensitization of the P2X2/3 Received Body Type is the answer to the P2X2 Received Body Type. The Possibility is strong and the support is strong. This year, the above results are listed in the public list and it is necessary to complete the thesis and add the main line of the paper. The time of writing this report has been open to the public since submissions were accepted. The methods are as follows: the use of molecules, the application of scholars, and the disclosure of technology.また, 両lateral electroporation method も, weight loss, abnormal movement などの problem なく line うことがpossible となり, in The use of vivo is possible and it is possible to use it. One party, the new problem point, the Vagus God, the way of thinking, the difference between the left and right of the molecular characteristics, the difference between the left and right, and the above.大きいこと, a molecule that seeks the final manifestation of the mind once and for all, a molecule that is similar to the nature of のしかし薬理学脳内に発appearsしており、そのノックダウンのeffectがI expected the aboveに単正ではないこと、なIt is necessary to know what is new and what is new and what is necessary after the disclosure of this technology.