ノロウイルスに対する迅速診断法の開発

诺如病毒快速诊断方法的研制

• 批准号: 19659166
• 负责人: 高橋 和郎
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: Osaka Prefectural Institute of Public Health
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2009
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-19659166/
• 关键词: ノロウイルス; 迅速診断; リコンビナントVp蛋白; リコンビナント蛋白

ノロウイルスは主に小児や高齢者の施設で集団感染を起こし、また食中毒も起こすことから、感染防止対策上迅速な診断が必要であるが、現行のPCR法では1日を要する。本研究では臨床現場において約10分で診断可能なイミュノクロマト法を開発することを目的とする。H19年度に多種のノロウイルスでも共通の抗原エピトープを有すると推定されるリコンビナントVp蛋白(rVp)の作製を行い、H20年度に完了し、これをウサギに免疫し抗体を得て、これを精製した。本年度はこの抗体を固相に結合させ、サンドイッチ法を用いて発光系による検出法を開発し、さらに感度を上げることに成功した。本方法のrVpに対する検出限界を検討し、0.1μg/mlまで検出可能であった。ノロウイルス陽性の便3検体に対して高いカウント数を示したが、非ノロウイルス下痢便でも、バックグラウンドに比較してやや高めのカウントを示した。この非特異的な発光反応を抑制するために、便の懸濁液を熱処理などの処理を行い、カウントが減少するか検討したが、応用可能な手段は認めることが不可能であった。現在さらに非特異的反応が生じない方法を発見すべく検討している。

It is necessary to establish a rapid diagnosis strategy for infection prevention by using PCR. This study is about 10 minutes from the clinical scene. In H19, the production of a variety of common antigens was estimated, and in H20, the production of antibodies was completed. This year, the antibody was successfully developed by solid-phase binding and detection methods. The detection limit of rVp in this method is discussed, and 0.1μg/ml can be detected. The number of items in the positive category is shown in the table below. The number of items in the positive category is shown in the table below. This non-specific light reflection is suppressed, and the suspension is heat treated, and reduced, and recognized by possible means. Now, non-specific anti-virus methods are available for investigation.