非受容体型チロシンキナーゼSykの子宮内膜脱落膜化に与える影響の解析

研究開始当初の背景:ヒト子宮内膜間質細胞において、mAC特異的阻害剤であるTSA(trichostatin A)が転写に作用した結果、内膜間質細胞の脱落膜化においてIGFBP-1やprolactinなど分化マーカーの亢進を示したとする論文(JBC 2003)がある。核内代謝への影響と帰結しているが、TSAは核内HDACのみならず、細胞質内に存在するHI)AC6も阻害することから、細胞質内のチロシンキナーゼSykとHDACとの関連性を示す論文(Genes to Cells 2009)をもとに、子宮内膜間質細胞の分化への影響を調べる意義はあると思われた。現時点においても、チロシンキナーゼSykの脱落膜化との関連性を指摘する論文は存在しない。研究の目的:生理的現象の解明のみならず、不妊・不育医療における疾患の原因を解明するため、子宮内膜への非受容型チロシンキナーゼSykの発現を証明し、P4-PR刺激に伴う核内での転写の亢進時にピストンのアセチル化・脱アセチル化の修飾のスイッチングにおいて、HDACを介したSykの関与を明らかにする事を目的とした。研究の方法:ヒト正常子宮内膜間質細胞を用いた脱落膜化モデルの培養系確立には、患者へのインフォームドコンセントを得た上でのサンプル採集であり、子宮内膜間質細胞サンプルは、立ち上げとして貴重であった。そのため、事前準備として、抹消血より分離した単球や細胞株(32D等)の培養にて、安定した培養環境の樹立を試みた。研究の成果:開始当初3ヶ月で、培養系の安定を得たが、その直後、細菌感染が培養室内で繰り返し認められ、原因が特定できなかった。続く4ヶ月間は、感染源となる試薬の特定と入れ替えにつとめたが、予算の都合上、総入れ替えを当初は躊躇してしまい、しばらく改善されなかった。試薬総入れ替え、培養室フィルターチェックを含め改善を図ったが、効果がなく、その後、出入りする者の制限と監視、最終的にはインキュベーターも入れ替えた。今年度より改善を得たが、大学病院から他府県への異動を命ぜられ、研究継続が停止した。

研究開始当初の背景:ヒト子宮内膜間質細胞において、mAC特異的阻害剤であるTSA(trichostatin A)が転写に作用した結果、内膜間質細胞の脱落膜化においてIGFBP-1やprolactinなど分化マーカーの亢進を示したとする論文(JBC 2003)がある。核内代謝への影響と帰結しているが、TSAは核内HDACのみならず、細胞質内に存在するHI)AC6も阻害することから、細胞質内のチロシンキナーゼSykとHDACとの関連性を示す論文(Genes to Cells 2009)をもとに、子宮内膜間質細胞の分化への影響を調べる意義はあると思われた。現時点においても、チロシンキナーゼSykの脱落膜化との関連性を指摘する論文は存在しない。研究の目的:生理的現象の解明のみならず、不妊・不育医療における疾患の原因を解明するため、子宮内膜への非受容型チロシンキナーゼSykの発現を証明し、P4-PR刺激に伴う核内での転写の亢進時にピストンのアセチル化・脱アセチル化の修飾のスイッチングにおいて、HDACを介したSykの関与を明らかにする事を目的とした。研究の方法:ヒト正常子宮内膜間質細胞を用いた脱落膜化モデルの培養系確立には、患者へのインフォームドコンセントを得た上でのサンプル採集であり、子宮内膜間質細胞サンプルは、立ち上げとして貴重であった。そのため、事前準備として、抹消血より分離した単球や細胞株(32D等)の培養にて、安定した培養環境の樹立を試みた。研究の成果:開始当初3ヶ月で、培養系の安定を得たが、その直後、細菌感染が培養室内で繰り返し認められ、原因が特定できなかった。続く4ヶ月間は、感染源となる試薬の特定と入れ替えにつとめたが、予算の都合上、総入れ替えを当初は躊躇してしまい、しばらく改善されなかった。試薬総入れ替え、培養室フィルターチェックを含め改善を図ったが、効果がなく、その後、出入りする者の制限と監視、最終的にはインキュベーターも入れ替えた。今年度より改善を得たが、大学病院から他府県への異動を命ぜられ、研究継続が停止した。