細胞内膜系における脂質非対称性制御機構の解析

内膜系统脂质不对称控制机制分析

• 批准号: 25840064
• 负责人: 佐野 孝光
• 金额: $ 2.91万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2013-04-01 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-25840064/
• 关键词: 脂質; ホスファチジルセリン; レトロマー複合体; 出芽酵母

生体膜は脂質二重層を形成し、それを構成するリン脂質は非対称に分布している。ホスファチジルセリン（PS）は、細胞膜では内層（細胞質側）に多く存在しているが、ERやゴルジ体では内腔側を向いており、細胞膜とは異なる脂質非対称性制御機構の存在が示唆される。本研究では、細胞内PS局在に異常が生じる酵母変異株をPSプローブであるGFP-Lact-C2を用いてスクリーニングし、得られた因子を解析することにより、内膜系の脂質非対称性制御機構の解明を目指した。生育に必須ではない約4,500遺伝子のスクリーニングを行った結果、46の遺伝子を同定し、その機能とGFP-Lact-C2の局在から６つのグループ（初期エンドソーム-TGN経路、後期エンドソーム-TGN経路、multivesicular body (MVB)経路、クラスリンを介した輸送、ミトコンドリア関連、液胞融合）に分類した。これらのうち、後期エンドソームからトランスゴルジ網（TGN）への逆行輸送を仲介するレトロマー複合体に着目し、細胞内PS輸送への関与について検討した。レトロマー複合体の欠損株では、GFP-Lact-C2は液胞膜に局在しており、レトロマー複合体が後期エンドソームからTGNへPSを選択的に輸送する可能性が考えられた。また、レトロマー複合体のVps5とVps17はPSを含むリポソームと結合し、その結合はVps5とVps17のBARドメインの持つ正電荷と負電荷を持つ脂質との電荷を介した結合であることが示唆された。さらに、Vps5とVps17は、PS依存的にリポソームをチューブ状に変形させた。これらの結果から、レトロマー複合体の構成因子であるVps5とVps17がPSと電荷により結合し、後期エンドソームからTGNへPSを輸送する可能性が示唆された。

The <s:1> lipid bileves of the biological membrane を form を and それを constitute the するリ <s:1> non-symmetrical に distribution of <s:1> lipids <s:1>, <s:1> て る る る. ホ ス フ ァ チ ジ ル セ リ ン は (PS), cell membrane で は lining (cytoplasmic side) more than に く し て い る が, ER や ゴ ル ジ body で は lumen side を to い て お り, cell membrane と は different な る lipid non said seaborne system exist the royal institution の が in stopping さ れ る. This study で は, intracellular PS bureau in abnormal に が じ る - different yeast strains を PS プ ロ ー ブ で あ る GFP - Lact - C2 を with い て ス ク リ ー ニ ン グ し, ら れ た factor analytical す を る こ と に よ り, lining is の lipid non said seaborne system royal institution の interpret を refers し た. Fertility に must で は な い about 4500 legacy 伝 son の ス ク リ ー ニ ン グ を line っ た results, 46 の but 伝 を with し, そ の function と GFP - Lact - C2 の bureau in か ら 6 つ の グ ル ー プ (early エ ン ド ソ ー ム - TGN 経 road, late エ ン ド ソ ー ム - the TGN 経 road, multivesicular body (MVB) pathway, <s:1> ラスリ を を を transport, <s:1> トコ ドリア ドリア association, liquid-cell fusion (に classification た た. こ れ ら の う ち, late エ ン ド ソ ー ム か ら ト ラ ン ス ゴ ル ジ network (TGN) へ の retrograde transport を placement す る レ ト ロ マ ー complex に with mesh し, intracellular PS conveying へ の masato and に つ い て beg し 検 た. レ ト ロ マ ー complex の owe damage strain で は, GFP - Lact - C2 は vacuole membrane に bureau in し て お り, レ ト ロ マ ー complex が late エ ン ド ソ ー ム か ら TGN へ PS を sentaku に conveying す る possibility が exam え ら れ た. ま た, レ ト ロ マ ー complex の Vps5 と Vps17 は PS を containing む リ ポ ソ ー ム と し, そ の combining は Vps5 と Vps17 の BAR ド メ イ ン の hold つ を と negative charge a つ lipid と の charge を interface し た combining で あ る こ と が in stopping さ れ た. Youdaoplaceholder0, Vps5とVps17, PS dependent にリポソ ムをチュ ムをチュ ブ に variant させた. こ れ ら の results か ら, レ ト ロ マ ー complex の constitute factor で あ る Vps5 と Vps17 が PS と charge に よ り し, late エ ン ド ソ ー ム か ら TGN へ PS を conveying す が る possibility in stopping さ れ た.

项目成果

レトロマー複合体を介したホスファチジルセリン輸送機構の解析

通过逆转录酶复合物分析磷脂酰丝氨酸转运机制

• 发表时间: 2014
• 作者: Yamagami K;Yamamoto T;Sakai S;Mioka T;Sano T;Igarashi Y;Tanaka K.;Masahiro Onoguchi and Yukiko Gotoh;佐野孝光 伊藤謙 伊藤絵里子 鎌田このみ 田中一馬
• 通讯作者: 佐野孝光 伊藤謙 伊藤絵里子 鎌田このみ 田中一馬

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