ウシ胚発生能に及ぼすグルココルチコイドの影響とネコ子宮内膜の機能調節に関する研究

糖皮质激素对牛胚胎发育及猫子宫内膜功能调控的研究

基本信息

批准号：
08F08733
负责人：
奥田潔
金额：
$ 0.77万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

项目摘要

これまでにウシにおいて活性型グルココルチコイドであるコルチゾル(GC)が子宮内膜機能を調節することで妊娠に重要な役割を果たす可能性が示されてきた。しかしながら、GCが直接胚に及ぼす影響ならびに卵管に及ぼす影響については明らかにされていない。そこでウシ胚発生能に関するグルココルチコイドの影響を調べるため、ウシ初期胚ならびに卵管におけるGC合成酵素である11β-HSDおよびグルココルチコイドレセプター(GCR)mRNA発現を調べた。11β-HSD,GCRともに胚には発現がみられなかったが、卵管において発現がみられたことから、ウシにおいてGCは胚に直接作用するのではなく、卵管上皮細胞への作用を介して着床前の胚に作用する可能性が示された。また、ネコ子宮における機能調節機構を明らかにするために、ネコ子宮内膜における上皮および間質細胞の単離法を確立し、採取した細胞を用いてプロジェステロン(P4)および17β-エストラジオール(E2)がプロスタグランディン(PG)分泌ならびにPG合成酵素であるPTGS2 mRNA発現に及ぼす影響を調べた。上皮細胞においてE2単独またはP4との組み合わせ添加によりPGF2α分泌は刺激され、PGE2分泌はP4により刺激された。間質細胞ではE2およびP4ともにPG分泌に影響を及ぼさなかった。またE2およびP4ともに両細胞におけるPTGS2 mRNA発現に影響を及ぼさなかった。これらの結果から、性ステロイドホルモンは、子宮内膜におけるPG分泌に作用するが、この作用はPTGS2 mRNA発現変化を介したものではない可能性が示された。さらに同様の培養系を用い、TNFαおよびオキシトシン(OT)のPG分泌ならびにPG合成酵素であるシクロオキシゲナーゼ(COX2)発現への影響を検討した。その結果、他の動物種と同様にOTおよびTNFαはそれぞれ上皮細胞および間質細胞のPG分泌を刺激するがCOX2の発現には影響しないことが明らかとなった。

迄今为止，已经表明，活性糖皮质激素皮质醇（GC）通过调节子宫内膜功能在妊娠中起重要作用。但是，GCS直接对胚胎和输卵管的影响尚未澄清。为了研究糖皮质激素对牛胚胎发育潜力的影响，我们研究了早期牛胚胎和输卵管中GC合酶11β-HSD和糖皮质激素受体（GCR）mRNA的表达。尽管在胚胎中均未表达11β-HSD和GCR，但输卵管中的表达表明GCS不直接作用于牛的胚胎，而是通过其对输卵管上皮细胞的作用在植入之前对胚胎作用。此外，为了阐明猫子宫中功能调节的机制，我们在猫子宫内膜中建立了一种隔离方法的上皮细胞和基质细胞的隔离方法，并使用收集的细胞研究孕激素（P4）和17β-雌二醇（E2）（E2）对Prostaglandin（PG）（PG）（PG）（PG）分泌和PGS 2 mrna pg Synts pg Synts pg Syntys pg Syntys pg Syntys的影响。通过单独添加E2或与P4结合，在上皮细胞中刺激了PGF2α的分泌，并且P4刺激PGE2分泌。 E2或P4均未影响基质细胞中的PG分泌。此外，E2和P4均未影响两个细胞中的PTGS2 mRNA表达。这些结果表明，性类固醇激素对子宫内膜的PG分泌作用，但是这种作用可能不会因PTGS2 mRNA表达的改变而介导。此外，研究了TNFα和催产素（OT）对PG分泌的影响以及PG合酶环氧合酶（COX2）的表达。结果，可以发现，与其他动物物种一样，OT和TNFα分别刺激上皮细胞和基质细胞中的PG分泌，但不影响COX2的表达。