低酸素誘導性転写因子(Hif-1)の発現調節による抗血管新生療法の開発

通过调节缺氧诱导转录因子（Hif-1）的表达开发抗血管生成疗法

基本信息

批准号：
18658114
负责人：
奥田潔
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2006
资助国家：
日本
起止时间：
2006 至 2007
项目状态：
已结题

项目摘要

昨年度は、(1)ウシ黄体内血管内皮細胞の単離・継代・保存方法を確立するとともに(Journal of Reproduction and Developmentに掲載)、(2)ウシ黄体におけるHif-1αおよびVEGF発現の周期的変化および培養ウシ黄体細胞を用いた解析により、ウシ黄体の形成に低酸素環境によって誘導される血管新生の関与することを明らかにした(本年5月の国際繁殖生物学会(WCRB,ハワイ)にて発表決定)。本年度は(3)アポトーシス誘導法の確立、(4)低酸素誘導性血管新生モデルの作出といった基礎研究を進展させ、(5)展開研究(in vivoにおける黄体内血管新生阻害)における成果を目指した。(3)既に黄体細胞においてアポトーシスを誘導することの知られているサイトカイン(TNF,IFNG,FASLG)を添加し、血管内皮細胞の細胞死およびアポトーシスの指標となるアポトーシス小体ならびにDNAの断片化についてそれぞれ検討した。その結果、いずれのサイトカインによっても黄体細胞より短い培養時間でアポトーシスが誘導された。(4)低酸素誘導性血管新生モデルを作出する目的で、ウシ黄体由来血管内皮細胞を低酸素環境において培養した。その結果、酸素濃度0-3%ではアポトーシスが誘導され、5%以上においては細胞数に変化は認められず、血管新生モデルの作出には至らなかった。今後、血中に含まれる成長因子、または顆粒層細胞の産生する物質を様々な酸素濃度において添加することにより培養系における血管新生モデルの作出を目指す。血管内皮細胞とともに低酸素環境の影響を検討した黄体細胞において、低酸素環境はアポトーシスを誘導した。この成果は、本年2月にBiology of Reproductionに掲載された。(5)(4)において低酸素誘導性血管新生モデルの作出に及ばなかったことから、展開研究に発展させるには至らなかったが、今後はin vitroにおいて血管内皮細胞のHif-1発現抑制法を確立した後、in vivoにおいてヤギ形成期黄体内血管内皮細胞におけるHif-1発現抑制系の確立を目指す。

去年，（1）已建立的方法用于隔离，通过和保存牛曲叶叶曲库血管内皮细胞（发表在《繁殖与开发杂志》上），以及（2）HIF-1α和VEGF表达的周期性变化，使用含有的含有的lute的牛皮化形式揭示了含有的hif-1α和VEGF的表达。 Luteum（今年5月在国际生殖生物学学会（WCRB，WCRB）确认）。今年，我们已经进行了先进的基础研究，例如（3）建立诱导细胞凋亡的方法，（4）为缺氧诱导的血管生成创建模型，以及（5）旨在导致发展研究（体内抑制肌内血管生成）。（3）添加已经诱导黄体细胞凋亡的细胞因子（TNF，IFNG，FASLG），检查了凋亡的身体和DNA碎片化，这是血管内皮细胞的细胞死亡和凋亡的指标。结果，在较短的培养时间中，两种细胞因子诱导了凋亡。（4）在缺氧环境中培养牛叶黄素的血管内皮细胞，目的是创建缺氧引起的血管生成模型。结果，在0-3％的氧浓度下诱导凋亡，在5％或更高的情况下，未观察到细胞计数的变化，导致产生血管生成模型。将来，我们旨在通过在各种氧气浓度下添加由颗粒层细胞产生的血液或物质中包含的生长因子来创建培养系统的血管生成模型。低氧环境诱导了黄体细胞的凋亡，该细胞与血管内皮细胞一起研究了低氧环境的作用。该结果于今年2月发表在《生殖生物学》中。（5）和（4）没有产生缺氧引起的新血管化模型，因此无法发展发展为发育研究的研究。但是，将来，我们旨在建立一种在体外抑制血管内皮细胞中HIF-1表达的方法，然后建立一个在体内抑制山羊形成阶段HIF-1表达的系统。

项目成果

期刊论文数量（6）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

ウシ黄体の形成および退行における低酸素環境の意義

缺氧环境在牛黄体形成和退化中的意义

DOI：
发表时间：
2008
期刊：
影响因子：
0
作者：
西村亮;小見山純一;Acosta TJ;奥田潔
通讯作者：
奥田潔

Blood consentreations of O_2 and NO during PGF2α-induced luteolysis in cows.

PGF2α 诱导奶牛黄体溶解过程中 O_2 和 NO 的血液同源反应。

DOI：
发表时间：
2007
期刊：
影响因子：
0
作者：
Iwamoto D;Kishigami S;Taniguchi S;Abe Y;Matsui T;Kasamatsu A;Tatemizo A;Mitani T;Kato H;Matsumoto K;Hosoi Y;Wakayama T;Iritani A;Saeki K;Tomas J. ACOSTA
通讯作者：
Tomas J. ACOSTA

低酸素環境はウシ黄体細胞のプロジェステロン合成を抑制することによりアポトーシスを誘導する

缺氧环境通过抑制牛黄体细胞黄体酮合成诱导细胞凋亡