权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

血管内皮細胞のアポトーシス誘導による抗血管新生療法の開発

通过诱导血管内皮细胞凋亡来开发抗血管生成疗法

基本信息

批准号：
14656115
负责人：
奥田潔
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2003
项目状态：
已结题

项目摘要

昨年度はウシ黄体細胞由来血管内皮細胞においてFas mRNA発現が認められ、腫瘍壊死因子(TNFα)およびインターフェロン(IFN)-γがFasを介レたアポトーシス誘導機構に関与していることを明らかにした。本年度は、(1)成長因子のFasを介したアポトーシスにおよぼす影響、(2)アポトーシス誘導機構または抑制機構のメカニズム(bcl-2ファミリーのmRNA発現)、(3)血管内皮細胞にFas遺伝子導入を行うことによるアポトーシス誘導モデルの作出について検討した。1.TNFα、IFNγおよびFasリガンドの添加に加え、成長因子(VEGF,IGE,bFGE,EGF)を単独または組み合わせて添加し、血管内皮細胞の細胞死およびアポトーシスの指標となるアポトーシス小体ならびにDNAの断片化についてそれぞれ検討した。その結果、VEGF単独または、VEGFと他の成長因子の組み合わせ添加において、TNFα、IFNγおよびFasリガンドの誘導するアポトーシスが抑制された。さらに、これらの添加区においてアポトーシス小体ならびにDNAの断片化が減少した。2.1.の各添加区において、bcl-2およびbax mRNA発現について検討した。その結果、アポトーシスの抑制が認められたVEGF単独または、VEGFと他の成長因子を組み合わせた添加区において、baxに対するbcl-2発現の割合が高くなった。3.血管内皮細胞にFas遺伝子導入をしたアポトーシス誘導モデルマウスの作出を試みたが、生存能力が極めて低く、目的としている部位にFasリガンドを注入する実験には至らなかった。以上の結果から、ウシ黄体の血管内皮細胞において、VEGFなどの成長因子はFasを介したアポトーシスに対する抑制作用をもち、その作用はbaxに対するbcl-2発現を高めることによることが示唆された。今後は、アポトーシス誘導モデルマウスを改良し、生体におけるアポトーシス誘導機構の詳細について検討していく予定である。

The expression of Fas mRNA in luteal cells was detected by TNF-α and IFN-γ. This year, the following issues were discussed: (1) the influence of Fas gene expression on growth factors,(2) the mechanism of Fas gene induction and inhibition (bcl-2 mRNA expression), and (3) the mechanism of Fas gene induction in vascular endothelial cells. 1. TNF α, IFNγ, Fas and growth factors (VEGF,IGE,bFGE,EGF) are added separately, and the indexes of cell death and dysfunction of vascular endothelial cells are discussed. As a result, VEGF alone, VEGF and other growth factors were inhibited by the combination of TNFα, IFNγ and Fas. In addition, the DNA fragmentation in the region was reduced. 2.1. The detection of bcl-2 and bax mRNA expression in each of the additive regions. As a result, the expression of VEGF, VEGF and other growth factors was inhibited, and the expression of bcl-2 was increased. 3. The Fas gene is introduced into vascular endothelial cells and induced to produce Fas gene. The viability of Fas gene is very low. The target site is Fas gene. The above results show that the expression of bcl-2 in luteal vascular endothelial cells is higher than that in normal cells due to the inhibition of Fas and bax. In the future, we will improve the quality of the products and improve the quality of the products.