パーキンソン病におけるプロテアソーム活性制御とドパミンニューロン死の関係

1.カテコラミンがユビキチンプロテアソーム系に与える影響についての解析プロテアソーム活性低下により蓄積するZsProSensor-1をPC12細胞に強制発現させ、フローサイトメトリーにより、プロテアソーム活性の低下をZsProSensor-1の緑色蛍光強度を指標として判別し、細胞の生死はpropidium iodideを用い評価することで、細胞単位での解析を行った。パラコートを処置すると、プロテアソーム活性が低下した死細胞数の増加は小さかったのに対して、プロテアソーム活性が低下した生存細胞数は顕著に増加した。そこで、細胞内ドパミンを枯渇させると細胞毒性は抑制されたが、プロテアソーム活性が低下した細胞数は影響を受けなかった。次に、プロテアソーム活性低下を早めた場合、パラコートによる死細胞数の増加が抑制された。以上よりパラコートによるプロテアソーム活性の低下はドパミンを介した細胞死の経路とは無関係であり、むしろ細胞毒性に対して保護的に働く可能性が示唆された。2.HO-1とユビキチンプロテアソーム系の関係についての解析パーキンソン病患者の剖検脳においてHO-1の関与が報告されている。そこで、プロテアソーム活性低下による細胞保護作用について、HO-1に着目し、中脳初代培養細胞を用いて検討を行った。プロテアソーム阻害薬により、新規合成の亢進および分解の抑制を介して主にアストロサイトでHO-1タンパク量が増加した。プロテアブーム阻害薬を前処置すると、6-OHDA誘発ドパミンニューロン死に対し抵抗性を示し、その保護作用はHO-1阻害薬の同時適用によって抑制され、HO-1によるhemeの分解生成物は6-OHDA誘発ドパミンニューロン死を抑制した。プロテアソーム活性の低下によりアストロサイトで増加したHO-1は間接的にドパミンニューロンを保護することが示唆された。

1.カテコラミンがユビキチンプロテアソーム系に与える影響についての解析プロテアソーム活性低下により蓄積するZsProSensor-1をPC12細胞に強制発現させ、フローサイトメトリーにより、プロテアソーム活性の低下をZsProSensor-1の緑色蛍光強度を指標として判別し、細胞の生死はpropidium iodideを用い評価することで、細胞単位での解析を行った。パラコートを処置すると、プロテアソーム活性が低下した死細胞数の増加は小さかったのに対して、プロテアソーム活性が低下した生存細胞数は顕著に増加した。そこで、細胞内ドパミンを枯渇させると細胞毒性は抑制されたが、プロテアソーム活性が低下した細胞数は影響を受けなかった。次に、プロテアソーム活性低下を早めた場合、パラコートによる死細胞数の増加が抑制された。以上よりパラコートによるプロテアソーム活性の低下はドパミンを介した細胞死の経路とは無関係であり、むしろ細胞毒性に対して保護的に働く可能性が示唆された。2.HO-1とユビキチンプロテアソーム系の関係についての解析パーキンソン病患者の剖検脳においてHO-1の関与が報告されている。そこで、プロテアソーム活性低下による細胞保護作用について、HO-1に着目し、中脳初代培養細胞を用いて検討を行った。プロテアソーム阻害薬により、新規合成の亢進および分解の抑制を介して主にアストロサイトでHO-1タンパク量が増加した。プロテアブーム阻害薬を前処置すると、6-OHDA誘発ドパミンニューロン死に対し抵抗性を示し、その保護作用はHO-1阻害薬の同時適用によって抑制され、HO-1によるhemeの分解生成物は6-OHDA誘発ドパミンニューロン死を抑制した。プロテアソーム活性の低下によりアストロサイトで増加したHO-1は間接的にドパミンニューロンを保護することが示唆された。