イヌ毛包幹細胞の生物学的特性の解析とそれを用いた毛包再構成の試み

狗毛囊干细胞生物学特性分析及利用其重建毛囊的尝试

• 批准号: 08J07102
• 负责人: 小林 哲郎
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Gifu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08J07102/
• 关键词: イヌ; 皮膚; 幹細胞; 毛包; ケラチノサイト; バルジ; 再生; 毛乳頭; 犬; 毛包幹細胞

申請者は前年度にイヌの毛包バルジ領域に細胞の分裂速度が遅いという幹細胞の特徴を持った細胞が存在し、これらの細胞集団がヒトやマウスの毛包幹細胞マーカーを発現し、in vitroで高い増殖能を持つことを明らかにした。この結果を受け平成22年度は、1.イヌ毛乳頭細胞の分離、培養、生物学的特徴の解析を行い、2.毛包再構成の系を用いてイヌバルジ細胞の多分化能の検討を行い、3.さらにWntシグナル調節因子を中心にイヌバルジ細胞の培養条件の検討を行った。過去の報告の通りイヌ毛乳頭を顕微鏡下で分離し培養することに成功した。イヌ培養毛乳頭細胞はヒトやマウスと同様にALPやWIF1などの毛乳頭マーカーを発現していた。培養条件の検討を行った結果、ケラチノサイト条件培地やラミニンコート培養皿が毛乳頭マーカーの発現の維持に寄与した。毛包再構成の系において、イヌバルジ細胞と胎児マウス真皮細胞を混合し移植したところ、肉眼的にも組織学的にも完全な成長期毛包および脂腺、表皮の再構成が認められた。再構成された組織においてはバルジ細胞および脂腺マーカーの遺伝子発現がイヌ特異的なプライマーを用いて検出された。これにより、移植したイヌバルジ細胞が多分化能を持ち、毛包を再構成した可能性が示唆された。また分離した細胞をWntシグナル活性化物質と共に培養したところ、各種バルジマーカーの発現が低下する一方、ロリクリンなどの角化細胞分化マーカーの発現が上昇した。これにより、Wntシグナルを抑制することでバルジ細胞の幹細胞としての性質が保たれることが示唆された。以上の結果から、多分化能を持つイヌ毛包バルジ細胞を幹細胞の性質を維持したまま培養することで、再生医療の優れた細胞供給源になり得る可能性が示された。

In the past year, the applicant's hair cells in the field of hair cells have been divided at a high speed, and the characteristics of stem cells have been maintained. The cell population has been developed and the high growth rate of stem cells in vitro has been maintained. The results were summarized as follows: 1. Isolation, culture, and analysis of biological characteristics of hair follicle papilla cells; 2. Study of multi-differentiation ability of hair follicle cells using hair follicle reconstitution; 3. Study of culture conditions of hair follicle cells using Wnt regulatory factors. In the past, we have reported successful isolation of hair papilla under microscope. The hair papilla cells in culture were developed in the same way as ALP WIF1. Culture conditions for the study of results, culture conditions for the study of the study of culture conditions for the study of hair papilla development and maintenance The hair follicle remodeling system is composed of hair follicle cells, fetal dermal cells, and mixed grafts. Histological studies show that hair follicle cells and epidermal remodeling are complete during the growth period. In addition, it is necessary to construct a new type of tissue, such as cell and lipid, and to develop a new type of tissue. This indicates the possibility of cell differentiation and re-formation. The expression of activated substances in isolated cells decreased while the expression of keratinocyte differentiation increased in co-culture. The nature of stem cells is protected by the protection of the stem cells. The above results demonstrate the possibility of maintaining the properties of stem cells in culture by maintaining the ability to differentiate into multiple cells, and to obtain an optimal cell supply for regenerative medicine.

项目成果

Identification and isolation of highly proliferative canine hair follicle bulge cell, promising candidates for stem cells

鉴定和分离高度增殖的犬毛囊膨出细胞，有前途的干细胞候选者

• 发表时间: 2008
• 作者: 曽川洋光;寺田佳世;三田文雄;増田俊夫;小林哲郎;小林哲郎
• 通讯作者: 小林哲郎

イヌの毛包幹細胞の同定および生物学的特徴の解析

狗毛囊干细胞的鉴定及生物学特性分析

• 发表时间: 2009
• 作者: 曽川洋光;寺田佳世;三田文雄;増田俊夫;小林哲郎
• 通讯作者: 小林哲郎

Identification of human bulge cell counterpart in canine hair follicle : A valuable material for stem cell investigation

犬毛囊中人类凸出细胞对应物的鉴定：干细胞研究的宝贵材料

• 发表时间: 2008
• 作者: 曽川洋光;寺田佳世;三田文雄;増田俊夫;小林哲郎;小林哲郎;小林哲郎
• 通讯作者: 小林哲郎