消化管コレステロール吸収におけるNPC1L1と胆汁中液性因子との相互作用の解析

in vitroにおいて見出されたNPC1L1によるNPC2の分泌抑制機構が生体内でも機能し得るのか検証すべく、NPC1L1ならびにNPC2を発現するアデノウィルスを用いてヒト肝臓と同程度に両蛋白質を発現するモデルマウスを構築し、胆汁中NPC2量の変動を解析した。その結果、NPC1L1を肝臓に発現するマウスは発現しないマウスに比べて、NPC2の胆汁分泌量が著しく低下しており、上記制御機構は生体内においても機能し得ることが示唆された。一方で、胆汁中NPC2の生理機能についても検証を行った。NPC2を発現するアデノウィルスをマウスに感染し、胆汁中NPC2量を増加させたところ、胆汁中へのコレステロール排出量が有意に上昇した。そこで、毛細胆管膜上に発現し肝細胞から胆汁中へのコレステロール排出を担うABCG5/G8のコレステロール排出活性に及ぼす分泌型NPC2の影響について、ABCG5/G8のin vitro機能評価系を用いて検討した。その結果、精製したNPC2蛋白質の添加によりABCG5/G8のコレステロール排出活性は有意に上昇し、分泌型NPC2がABCG5/G8の機能促進因子として働くことでコレステロールの胆汁排泄を制御している可能性が考えられた。以上の結果は、これまで未知であった胆汁中NPC2の生理機能を示唆した点で、またNPC2の胆汁分泌制御というNPC1L1の新たな生理機能を見出した点で生理学的に重要なものである。さらに、NPC2ならびにABCG5/G8がコレステロールに加えて植物性ステロールや幾つかの脂溶性物質に関して結合活性や排出活性を有していることから、NPC1L1によるNPC2の胆汁分泌抑制ならびに胆汁中NPC2の減少によるABCG5/G8の活性低下といった相互連関はコレステロールを含む様々な脂溶性物質の全身動態を考える上でも重要な知見であると考えている。

in vitroにおいて見出されたNPC1L1によるNPC2の分泌抑制機構が生体内でも機能し得るのか検証すべく、NPC1L1ならびにNPC2を発現するアデノウィルスを用いてヒト肝臓と同程度に両蛋白質を発現するモデルマウスを構築し、胆汁中NPC2量の変動を解析した。その結果、NPC1L1を肝臓に発現するマウスは発現しないマウスに比べて、NPC2の胆汁分泌量が著しく低下しており、上記制御機構は生体内においても機能し得ることが示唆された。一方で、胆汁中NPC2の生理機能についても検証を行った。NPC2を発現するアデノウィルスをマウスに感染し、胆汁中NPC2量を増加させたところ、胆汁中へのコレステロール排出量が有意に上昇した。そこで、毛細胆管膜上に発現し肝細胞から胆汁中へのコレステロール排出を担うABCG5/G8のコレステロール排出活性に及ぼす分泌型NPC2の影響について、ABCG5/G8のin vitro機能評価系を用いて検討した。その結果、精製したNPC2蛋白質の添加によりABCG5/G8のコレステロール排出活性は有意に上昇し、分泌型NPC2がABCG5/G8の機能促進因子として働くことでコレステロールの胆汁排泄を制御している可能性が考えられた。以上の結果は、これまで未知であった胆汁中NPC2の生理機能を示唆した点で、またNPC2の胆汁分泌制御というNPC1L1の新たな生理機能を見出した点で生理学的に重要なものである。さらに、NPC2ならびにABCG5/G8がコレステロールに加えて植物性ステロールや幾つかの脂溶性物質に関して結合活性や排出活性を有していることから、NPC1L1によるNPC2の胆汁分泌抑制ならびに胆汁中NPC2の減少によるABCG5/G8の活性低下といった相互連関はコレステロールを含む様々な脂溶性物質の全身動態を考える上でも重要な知見であると考えている。