Generation of human artificial vector to allow the reproduction of gene copy number variation

生成人类人工载体以复制基因拷贝数变异

• 批准号: 20310120
• 负责人: INOUE Toshiaki
• 金额: $ 10.98万
• 依托单位: Tottori University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2008 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20310120/
• 关键词: ゲノムコピー数多型; 人工染色体; 人工染色体ベクター; コピー数多型

PhiC31-based recombination allows the multiple introduction of transgenes when the recipient sites(attB sites) are available. We sought to apply this system to the human artificial chromosome(HAC) vector, which can carry the huge size of transgene. We successfully generated the HAC vector carrying multiple copies of attB sites(attB-HAC) in CHO cells. It was confirmed that transgenes tagged with the donor site(attP site) can be loaded onto the attB sites on the attB-HAC, in independent manner of PhiC31 integrase. Intriguingly, Southern blot analyses implicated that multiple copies of transgenes can be loaded onto the attB-HAC in one recombination-reaction in CHO cells. The present study suggests the efficacy of attB-HAC as a tool for reproduction of gene copy number variation in animal models and cell models.

当受体位点（attB位点）可用时，基于PhiC 31的重组允许转基因的多次引入。我们试图将该系统应用于人类人工染色体（HAC）载体，它可以携带巨大的转基因。我们成功地在CHO细胞中产生了携带多个attB位点拷贝的HAC载体（attB-HAC）。证实了标记有供体位点（attP位点）的转基因可以以独立于PhiC 31整合酶的方式加载到attB-HAC上的attB位点上。有趣的是，Southern印迹分析表明，在CHO细胞中的一次重组反应中，转基因的多个拷贝可以加载到attB-HAC上。本研究表明attB-HAC作为在动物模型和细胞模型中再现基因拷贝数变异的工具的功效。

项目成果

実験医学別冊「実験医学別冊培養細胞実験ハンドブック」細胞融合法

实验医学专版《实验医学专版培养细胞实验手册》细胞融合方法

• 发表时间: 2009
• 作者: 則兼聡子;井上敏昭;押村光雄
• 通讯作者: 押村光雄

ヒト5番染色体上に存在する新規テロメレース抑制遺伝子の同定

人类5号染色体上新型端粒酶抑制基因的鉴定

• 发表时间: 2011
• 作者: 小野頌太;島弘幸;久郷裕之
• 通讯作者: 久郷裕之

鳥取大学医学部生命科学科ゲノム医工学分野

鸟取大学医学院、生命科学系、基因组医学工学系

Chromosome transfer via microcell fusion utilizing fusogenic envelope proteins of Measles virus

利用麻疹病毒的融合包膜蛋白通过微细胞融合进行染色体转移

• 发表时间: 2010
• 作者: Motonobu Katoh;Yasihiro Kazuki;Haruka Takahashi;Kanako Kazuki;Naoyo Kajitani;Masato Takiguchi;Yuji Nakayama;Takafumi Nakamura;Toshiaki Inoue;Mitsuo Oshimura
• 通讯作者: Mitsuo Oshimura

SIRT2発現低下による微小管阻害剤耐性獲得とその分子機構

SIRT2表达降低导致微管抑制剂耐药的获得及其分子机制

• 发表时间: 2009
• 作者: 李艶沢;押村光雄;井上敏昭
• 通讯作者: 井上敏昭