Die Entwicklung des vaskulären und neuronalen Systems nach konditionaler Deletion der Rezeptortyrosinkinase Flk1

受体酪氨酸激酶Flk1条件性缺失后血管和神经系统的发育

基本信息

  • 批准号:
    5382573
  • 负责人:
  • 金额:
    --
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    德国
  • 项目类别:
    Research Fellowships
  • 财政年份:
    2002
  • 资助国家:
    德国
  • 起止时间:
    2001-12-31 至 2003-12-31
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

Das vaskuläre System ist das erste Organ, welches im Rahmen der Embryonalentwicklung entsteht. Homozygote Knockout-Mäuse für die Rezeptortyrosinkinase Flk1 sind letal zwischen Tag E8.5 und E9.5 der Embryonalentwicklung, da vaskuläre Strukturen nicht ausgebildet werden. Um die Funktion von Flk1 in der späteren fetalen und postnatalen Entwicklungsphase sowie in der adulten Maus zu analysieren, muss man daher konditionale Knockout-Mäuse generieren. Hierzu verwende ich das Cre/loxP-System. Das erste Exon von Flk1 wird von loxP-Sequenzen flankiert. Homozygote Mäuse mit dieser somatischen Mutation sollten aller Erwartung nach mit Wildtyptieren vergleichbar sein. Kreuzt man sie allerdings mit gewebespezifischen Cre-Mauslinien, so erfolgt die Cre-mediierte Exzision zwischen den loxP-Stellen, d.h. Exon 1 von Flk1 wird entfernt und das Protein wird nicht mehr translatiert. Um die Rolle von Flk1 im Endothel in der postnatalen Entwicklung zu analysieren wird mit einer induzierbaren Tie2CreERTM-Linie gekreuzt. Die Kreuzung mit einer spezifischen Cre-Linie für Neuronen ermöglicht mir, den Einfluss von Flk1 beim Aufbau des Neuronennetzwerkes zu ermitteln. Weiterhin soll mit einer Cre-Linie, die spezifisch im venösen System exprimiert wird, untersucht werden, welche Rolle Flk1 bei der Entwicklung des venösen Systems spielt.
血管系统是胚胎发育过程中的第一个器官。在胚胎发育过程中,酪氨酸激酶Flk 1基因敲除纯合子可使E8.5和E9.5标签互换,但血管结构不受韦尔登。Flk 1在妊娠胎儿和出生后发育中的作用在成年牛中也存在,因此必须进行基因敲除。我将向您介绍Cre/loxP系统。Flk 1的第一个外显子与loxP-测序结果一致。纯合子Mäuse与该个体突变将导致其在野生型中的表现。他们把自己的作品与Cre-Mauslinien的作品结合在一起,因此Cre-mediierte Exzision zwischen den loxP-Stellen,d.h. Flk 1的外显子1会被插入,而蛋白质不会被梅尔插入。Flk 1在出生后发育中的作用将通过一个完整的Tie 2CreERTM-Linie进行分析。Die Kreuzung mit einer spezifischen Cre-Linie für Neuronen ermöglicht mir,den Einfluss von Flk 1 beim Aufbau des Neuronennetzwerkes zu ermitteln.因此,我们需要一个Cre-Linie,该系统的特性将被执行,因此韦尔登将在开发该系统时使用Flk 1。

项目成果

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