ヒト血球系安定細胞株を用いた化学物質リスク評価システムの開発

利用稳定的人血细胞系开发化学物质风险评估系统

• 批准号: 09F09091
• 负责人: 松永 是
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Tokyo University of Agriculture and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09F09091/
• 关键词: ヒト血球系安定細胞; 化学物質リスク評価; 造血幹細胞; 細胞培養チップ

本研究では、ヒト血球系安定細胞株を樹立し、各血球細胞に対する化学物質のリスク評価システムを開発することを目的としている。本年度は、各血球細胞の安定細胞株樹立に先立ち、様々な血球細胞への分化が可能なヒト造血幹細胞に着目し、この細胞の長期培養及び分化制御技術の確立を目指した。さらに化学物質リスク評価を視野に入れた細胞培養チップの構築に着手した。希少細胞であるヒト造血幹細胞は非常に高価であり、また、長期培養や未分化維持の制御が困難であると言われている。本研究では、臍帯血からCD34陽性細胞として分離されてきた画分を用いて、ヒト造血幹細胞の獲得と長期培養を試みた。細胞表面マーカーに対する抗体染色、及びFACSにより解析した結果、多分化能を保持していると考えられるヒト造血幹細胞の割合がわずか3-4%の割合で存在していることが明らかとなった。そこで、本画分をソーティングにより回収した後、様々な培養条件(接着因子、培地組成、サイトカイン等)を検討した。その結果、ヒト造血幹細胞の細胞数を2週間でおよそ4倍、増幅可能であった。さらに、細胞培養チップの開発においては、単一細胞レベルで細胞捕捉が可能なデバイスと組み合わせた細胞培養チップを構築し、血球細胞の培養に成功した。本研究によりヒト血球系安定細胞株の樹立において、遺伝子導入を行うために必要な十分量の造血幹細胞の獲得が可能となり、今後は安定細胞株の作製に取り掛かる。さらに、ヒト血球系安定細胞株を捕捉した細胞培養チップにより、化学物質リスク評価に向けた検討を行う予定である。

The purpose of this study was the establishment of stable cell lines of blood cells and the evaluation of chemical substances in each blood cell system. This year, we are focusing on the establishment of stable cell lines of various blood cells, the possibility of differentiation of blood cells, hematopoietic stem cells, and the establishment of long-term cell culture and differentiation control technology.さらにchemical substanceリスクreview価をViewに入れたCell cultureチップのconstructにstartした. Rarely oligocytic hematopoietic stem cells are very difficult to control and maintain undifferentiated cells in long-term culture. In this study, we isolated and divided CD34-positive cells from cord blood and obtained hematopoietic stem cells and tested them in long-term culture. Antibody staining of the cell surface and the results of FACS analysis and maintenance of multidifferentiation abilityと考えられるヒトHematopoietic stem cell のcut がわずか3-4% のcut合でexisting していることが明らかとなった.そこで, this painting is divided into をソーティングによりした, 様々な culture conditions (following factors, soil composition, サイトカイン, etc.) and を検した. As a result, the number of hematopoietic stem cells was 4 times as high as 2 weeks, and the increase was possible.さらに, cell culture チップの开発においては, single cell レベルでcell capture がpossible The デバイスと group and the みわせたcell culture were constructed and the blood cells were cultured successfully. This study requires the establishment of a stable blood cell line and the introduction of posthumous cells. It is possible to obtain a tenth amount of hematopoietic stem cells, and it will be possible to produce stable cell lines in the future. Hematology, blood cell line stable cell line capture, cell culture, and chemical substances, review and review of the chemical substances, ask for approval from the company.

项目成果

A single-cell based biosensing device directed for lipophilic chemical scre ening and evaluation

一种基于单细胞的生物传感装置，用于亲脂性化学筛选和评估

• 发表时间: 2009
• 作者: Tetsushi Mori;他6名
• 通讯作者: 他6名

A stable human progesterone receptor expressing HeLa reporter cell line as a tool in chemical evaluation at the different cell-cycle phases.

• DOI: 10.1016/j.toxlet.2009.01.016
• 发表时间: 2009-04
• 期刊: Toxicology letters
• 影响因子: 3.5
• 作者: Tetsushi Mori;M. Murata;T. Yoshino;S. Nakasono;Fumiyo Saito;H. Takeyama;T. Matsunaga

A single-cell based microfluidic gradient device for the screening and evaluation of cytotoxic chemicals

用于筛选和评估细胞毒性化学物质的单细胞微流体梯度装置

• 发表时间: 2010
• 作者: モリテツシ;他6名
• 通讯作者: 他6名