ネコ免疫不全ウイルスの感染増殖機構の解明

阐明猫免疫缺陷病毒的感染和增殖机制

• 批准号: 21380180
• 负责人: 宮沢 孝幸
• 金额: $ 9.73万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2011
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21380180/
• 关键词: ネコ免疫不全ウイルス; インターフェロン; ISGylation; UBEL1; 免疫不全; クローニング; 抗ウイルス; ISG15; 受容体; 感染; CD134; リンパ球; 変異; CXCR4; エンベロープ

ネコはネコ免疫不全ウイルス(FIV)に感染すると、数年以上もの長い無症候キャリアー期を経て免疫不全状態になり、ネコヘルペスウイルスやネコカリシウイルスなどの感染症により死亡する。しかしながら大規模な疫学調査により、発症せずに6年以上経過するネコの割合も多いことが明らかになってきた。FIVの感染による後天性免疫不全症候群発症にはウイルス側の要因、ネコの遺伝学的および免疫学的背景、その他の感染要因が複雑に絡み合っていると考えられる。FIVを抑制する宿主因子はいくつか想定されている。ISG15はI型IFN刺激により発現される遺伝子の1つで、同分子がもつユビキチン様活性(ISG化活性)により様々なウイルスに対して抗ウイルス活性を示し、FIVにおいても抵抗性を発揮すると考えられる。ISG化にはISG15以外にISG化関連酵素群の共発現が必要である。そこで酵素群の1つであるネコUBE1L(FeUBEID遺伝子のクローニングを行い、さらに、各種細胞でのFeUBE1Lの発現状況およびI型IFN刺激による発現誘導の有無を確認した。CRFK細胞のcDNAライブラリーから、これまでに決定したFeUBE1L遺伝子配列をもとに設計したプライマーを用いてPCRを行い、全長のクローンを得た。また、未感作、ネコIFN-ω(FeIFN-ω)およびウシIFN-τ(BoIFN-τ)感作のFeT-J、3201、CRFK、fcwf-4、G355-5細胞でのFeUBE1L遺伝子の発現量をReal-Time RT-PCR法により定量した。FeUBE1LはFeIFN-ωおよびBoIFN-τにより誘導されることが明らかとなった。FeUBE1遺伝子のクローニングに成功したことから、今後、FeISG15の共発現により、in vitroでのISG化の系が確立でき、抗ウイルス活性のメカニズムを解明できると考えられる。

当猫被猫免疫缺陷病毒（FIV）感染时，它们在长期无症状的载流期在超过几年的长期无症状携带期之后就会变得免疫功能低下，并死于猫疱疹病毒和猫科动病毒等感染。但是，大规模的流行病学调查显示，有许多猫已经有六年多的症状出现。由于FIV感染而导致的免疫缺陷综合征的发展被认为是与病毒因素，CAT遗传和免疫学背景以及其他感染因素交织在一起的复杂。已经设想了一些抑制FIV的宿主因素。 ISG15是通过I型IFN刺激表达的基因之一，它由于分子的泛素样活性（ISGIZES活性）而表现出针对各种病毒的抗病毒活性，并且被认为对FIV具有抗性。除ISG15外，ISGyLation还需要ISG相关酶的共表达。因此，克隆了酶基之一的CAT UBE1L（FeubeID基因），并且在各种细胞中Feube1l的表达状态以及通过I型IFN刺激的表达诱导的存在或不存在。使用基于先前确定的Feube1l基因序列设计的引物进行PCR，并获得全长克隆。此外，确认了FET-J，3201，CRFK，FCWF-4和G355-5细胞在CAT IFN-ω（FEIFN-ω）和牛IFN-τ（BoIFN-τ）中的表达水平。通过RT-PCR方法定量。据表明，feube1l是由Feifn-ω和Boifn-τ诱导的。由于Feube1基因已成功克隆，因此人们认为Feisg15的共表达将建立一个体外iSgyLation系统，并且可以阐明抗病毒活性的机制。

项目成果

Differential diagnosis of feline leukemia virus subgroups using pseudotype viruses expressing green fluorescent

使用表达绿色荧光的假型病毒鉴别诊断猫白血病病毒亚群

• 发表时间: 2010
• 期刊: Journal of Veterinary Medical Science 72(印刷中)
• 作者: Nakamura;M.;Sato;E.;Miura;T;Baba;K.;Shimoda;T.;Miyazawa;T.
• 通讯作者: T.

Cellular and viral factors regulates the budding of feline endogenous Retrovirus.

细胞和病毒因子调节猫内源性逆转录病毒的出芽。

• 发表时间: 2010
• 作者: Fukuma;A.;Abe;M.;Morikawa;Y.;Miyazawa;T.;Yasuda;J.
• 通讯作者: J.

Focus Assay on FeLIX-Dependent Feline Leukemia Virus

• DOI: 10.1292/jvms.09-0194
• 发表时间: 2010-01-01
• 期刊: JOURNAL OF VETERINARY MEDICAL SCIENCE
• 影响因子: 1.2
• 作者: Nakaya, Yuki;Shojima, Takayuki;Miyazawa, Takayuki
• 通讯作者: Miyazawa, Takayuki

Identification and Characterization of Feline UBE1L Gene

猫 UBE1L 基因的鉴定和表征

• DOI: 10.1292/jvms.11-0337
• 发表时间: 2012
• 期刊: Journal of Veterinary Medical Science
• 影响因子: 1.2
• 作者: Sayumi Shimode;Takayuki Miyazawa;Takeshi Kobayashi;Hisaaki Sato;Taishi Tanabe
• 通讯作者: Taishi Tanabe

Isolation of an Infectious Endogenous Retrovirus in a Proportion of Live Attenuated Vaccines for Pets

• DOI: 10.1128/jvi.02715-09
• 发表时间: 2010-04-01
• 期刊: JOURNAL OF VIROLOGY
• 影响因子: 5.4
• 作者: Miyazawa, Takayuki;Yoshikawa, Rokusuke;Palmarini, Massimo
• 通讯作者: Palmarini, Massimo