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ネコ免疫不全ウイルスの感染増殖機構の解明

阐明猫免疫缺陷病毒的感染和增殖机制

基本信息

批准号：
21380180
负责人：
宮沢孝幸
金额：
$ 9.73万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2009
资助国家：
日本
起止时间：
2009 至 2011
项目状态：
已结题

项目摘要

ネコはネコ免疫不全ウイルス(FIV)に感染すると、数年以上もの長い無症候キャリアー期を経て免疫不全状態になり、ネコヘルペスウイルスやネコカリシウイルスなどの感染症により死亡する。しかしながら大規模な疫学調査により、発症せずに6年以上経過するネコの割合も多いことが明らかになってきた。FIVの感染による後天性免疫不全症候群発症にはウイルス側の要因、ネコの遺伝学的および免疫学的背景、その他の感染要因が複雑に絡み合っていると考えられる。FIVを抑制する宿主因子はいくつか想定されている。ISG15はI型IFN刺激により発現される遺伝子の1つで、同分子がもつユビキチン様活性(ISG化活性)により様々なウイルスに対して抗ウイルス活性を示し、FIVにおいても抵抗性を発揮すると考えられる。ISG化にはISG15以外にISG化関連酵素群の共発現が必要である。そこで酵素群の1つであるネコUBE1L(FeUBEID遺伝子のクローニングを行い、さらに、各種細胞でのFeUBE1Lの発現状況およびI型IFN刺激による発現誘導の有無を確認した。CRFK細胞のcDNAライブラリーから、これまでに決定したFeUBE1L遺伝子配列をもとに設計したプライマーを用いてPCRを行い、全長のクローンを得た。また、未感作、ネコIFN-ω(FeIFN-ω)およびウシIFN-τ(BoIFN-τ)感作のFeT-J、3201、CRFK、fcwf-4、G355-5細胞でのFeUBE1L遺伝子の発現量をReal-Time RT-PCR法により定量した。FeUBE1LはFeIFN-ωおよびBoIFN-τにより誘導されることが明らかとなった。FeUBE1遺伝子のクローニングに成功したことから、今後、FeISG15の共発現により、in vitroでのISG化の系が確立でき、抗ウイルス活性のメカニズムを解明できると考えられる。

Immune deficiency virus (FIV) infection, long-term symptoms for more than a few years, symptoms of immune insufficiency in the first few years, immune insufficiency in the first half of the year, and death in the first half of the year. Large-scale epidemic diseases have been reported for more than 6 years, and the disease has been cured for more than 6 years. The causes of acquired immune deficiency syndrome (FIV), the background of immunology, the background of immunology, and the infection of other diseases are due to infection. FIV suppresses the host factor. ISG15 type I IFN stimulation showed that there was no significant difference in the activity of the same molecule (ISG), the activity of the same molecule, the activity of anti-virus, the activity of resistance, the activity of resistance, the activity of isoglycan, the activity of resistance, the activity of resistance, the activity of isomerase. In addition to ISG ISG15, ISG linked to the enzyme group is necessary. The enzyme group (FeUBEID enzyme group) has been used to detect the presence of type I IFN stimuli in response to the presence of type I IFN stimuli in all kinds of cells. The CRFK cell is responsible for determining the size of the FeUBE1L device. The overall length of the device is high, and the full length of the device is successful. Interferon-ω (FeIFN- ω), interferon-ω (FeIFN- ω), interferon tau (BoIFN- τ) were expressed as FeT-J, 3201, CRFK, fcwf-4, G355-5 cells, FeUBE1L cells, and quantified by Real-Time RT-PCR method. FeUBE1L-ω-FeIFN-ω-FeIFN-ω-FeUBE1LFIFN-ω-FeUBE1 In the future, the FeISG15 system has been successfully detected, the in vitro ISG system has been established, and the anti-virus activity has been detected.