ボツリヌスHAと腸管上皮細胞の相互作用の解明

阐明肉毒杆菌HA与肠上皮细胞之间的相互作用

• 批准号: 21390128
• 负责人: 藤永 由佳子
• 金额: $ 11.73万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2011
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21390128/
• 关键词: 微生物; 細菌; 毒素; 上皮細胞バリア

ボツリヌス神経毒素は、腸管上皮バリアを通過して血中に移行することによって、ボツリヌス食中毒を発症させる。巨大タンパク質分子である本毒素がこのバリアを通過する機構は不明な点が多い。最近申請者らは、毒素に結合しているHA (Hemagglutinin)が腸管上皮細胞バリアを突破する新規機能を持つことを発見した。その1つにtranscytosisを促進する機能がある。本年度は、HAによるtranscytosis経路(細胞側)の解析を中心に行った。[HAが結合する腸管上皮アピカル側の分子の探索]前年度までの解析を含めて、HAはin situマウス結紮腸管およびin vitro培養細胞(Caco-2)で、transcytosisを引き起こすことが、コンフォーカル顕微鏡を用いたイメージング解析で明らかになってきた。今年度は、腸管上皮アピカル側膜上に存在し、HAが結合することにより、transcytosisを引き起こす分子の探索を行った。その結果、pull down法により、HAと結合するいくつかの膜タンパク質が得られた。そこで、それらについて、HA側の結合ドメインの解析を進めている。また、それらのタンパク質のノックアウトマウスを用いたHAおよびHA含有毒素複合体の腸管吸収の解析を進めている。

肉毒杆菌神经毒素通过将肠上皮屏障转移到血液中，从而发展出肉毒杆菌食物中毒。关于巨型蛋白质分子毒素通过该障碍的机制有许多未知的机制。最近，申请人发现毒素结合的HA（血凝素）具有新的功能，可以突破肠上皮细胞屏障。其中之一是促进转胞症的能力。今年，我们专注于使用HA分析跨介症途径（细胞侧）。 [探索与HA结合的肠上皮的顶端的分子]共聚焦显微镜成像分析表明，HA在原位小鼠的原位小鼠结扎的肠道和体外培养细胞（CACO-2）中引起跨经细胞增多（CACO-2）。今年，我们搜索了在肠上皮的顶膜上存在的分子，并在HA结合时会引起经胞胞病。结果，通过下拉方法获得了几种与HA结合的膜蛋白。因此，我们正在对HA侧的结合域进行分析。我们还使用这些蛋白质的基因敲除小鼠对含HA和HA的毒素复合物的肠道吸收分析。

项目成果

Botulinum HA targets E-cadherin to disrupt the intercellular epithelial barrier.

肉毒杆菌 HA 靶向 E-钙粘蛋白，破坏细胞间上皮屏障。

• 发表时间: 2010
• 作者: Sugawara Y;Matsumura T;Fujinaga;Y.
• 通讯作者: Y.

Disruption of the Epithelial Barrier by Botulinum Hemagglutinin (HA) (招待講演)

肉毒杆菌血凝素 (HA) 对上皮屏障的破坏（特邀演讲）

• 发表时间: 2009
• 作者: Karasuyama;H.;Tsujimura Y.;Obata;K.;and Mukai;K.;Yukako Fujinaga
• 通讯作者: Yukako Fujinaga

Food-borne botulism and transepithelial transport of botulinum toxin

食源性肉毒杆菌中毒和肉毒杆菌毒素的跨上皮转运

• 发表时间: 2010
• 作者: Yukako Fujinaga;Yo Sugawara;Takuhiro Matsumura;Yuki Takegahara
• 通讯作者: Yuki Takegahara

ボツリヌス毒素と腸管上皮細胞バリア破壊

肉毒杆菌毒素与肠上皮细胞屏障破坏

• 发表时间: 2009
• 期刊: 化学療法の領域 25
• 作者: Nakagawa T.;Tsuruoka;M.;Ogura;H.;Okuyama;Y.;Arima;Y.;Hirano;T.;and Murakami;M;藤永由佳子
• 通讯作者: 藤永由佳子

Interaction of botulinum toxin with the epithelial barrier.

肉毒杆菌毒素与上皮屏障的相互作用。

• 发表时间: 2010
• 期刊: Journal of Biomedicine and Biotechnology
• 作者: Fujinaga;Y.
• 通讯作者: Y.