ボツリヌス神経毒素複合体の宿主腸管上皮細胞バリア通過機構の解明

阐明肉毒杆菌神经毒素复合物穿过宿主肠上皮细胞屏障的机制

• 批准号: 18050020
• 负责人: 藤永 由佳子
• 金额: $ 4.03万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18050020/
• 关键词: ボツリヌス毒素; 腸管上皮細胞; transcytosis; tight junction; paracellular

前年度までに、ボツリヌスHAに上皮細胞間バリアを破壊する新規活性があること、およびこの活性により大量の神経毒素が腸管上皮細胞間隙から流入することが明らかになった。そこで本年度は、本活性のメカニズムをさらに詳細に解析するとともに、マウスin vivoにおいて、本活性の発現および、神経毒素の腸管吸収における意義を解析した。1)HAの上皮細胞間バリア破壊機構の解析16S毒素よりNAP-16成分(HAとNTNHの複合性)を単離し、以下の実験に用いた。NAP-16のTER低下活性をapicalから添加した場合と、basolateralから添加した場合で比較したところ、basolateralから添加した場合、apicalから添加した場合よりも少ない用量で作用を示し、作用を発現するまでの時間も短いことが観察された。このことからHAの作用点はbasolateral側細胞膜上にあることが推察された。抗HA抗体をbasolataral側に添加する実験系により、HAの作用点がbasolateral側細胞膜上にあることが明らかになった。したがって、16S毒素はまずapicalからtranscytosisによりbasolateral側へ移行し、basolateral側から細胞間接着を破壊し、その後細胞間隙から大量の神経毒素が流入する3stepメカニズムにより、巧妙に腸上皮バリアを通過していることが示唆された。2)in vivoでの本活性の発現マウス結紮腸管を用いて、HAを各種分子量のFITC-dextranと同時に添加した場合、HAによるFITC-dextranの体内移行が顕著に増大した。HRPや12S毒素の体内移行もHAは促進した。従って、HAはin vivoにおいても腸管上皮細胞間バリアを破壊することが明らかになった。

Before annual ま で に, ボ ツ リ ヌ ス HA に between epithelial cells バ リ ア を broken 壊 す る new rules on active が あ る こ と, お よ び こ の active に よ り large の god 経 toxin が insufflate epithelial cell gap か ら inflows す る こ と が Ming ら か に な っ た. そ こ で は this year, this activity の メ カ ニ ズ ム を さ ら に detailed analytical す に る と と も に, マ ウ ス in vivo に お い て, this activity の 発 now お よ び, god 経 toxin の insufflate 収 に お け る meaning を parsing し た. 1) HA の between epithelial cells バ リ ア broken 壊 institutions の parsing 16 s toxin よ り NAP - 16 components (HA と NTNH の compound) を 単 し, the following の be 験 に with い た. Low NAP - 16 の TER active を apical か ら add し た occasions と and basolateral か ら add し た occasions で compare し た と こ ろ and basolateral か ら add し た occasions, apical か ら add し た occasions よ り も less な い dosage を で role し, function を 発 now す る ま で の time Youdaoplaceholder1 short とが観 とが観 cha された. <s:1> と と らHA とが application point basolateral side cell membrane にある とが とが observation された. Anti HA antibody を basolataral side に add す る be 験 department に よ り, HA の point が basolateral membrane side に あ る こ と が Ming ら か に な っ た. し た が っ て, 16 s toxin は ま ず apical か ら transcytosis に よ り basolateral side へ transitional し, basolateral side か ら cells with indirect を broken 壊 し, そ の after intercellular か ら large inflows の god 経 toxin が す る 3 step メ カ ニ ズ ム に よ り, clever に バ intestinal epithelium Youdaoplaceholder0 indicates された by て て る とが とが. 2) the in vivo で の this activity の 発 now マ ウ ス ligation insufflate を with い て, HA を various molecular weight の FITC - dextran と also add し に た occasion, HA に よ る FITC - dextran の migration in vivo が 顕 に raised large し た. HRPや12S toxin migrates in the body や HA promotes た. Youdaoplaceholder0, HA にお in vivoにお て て intercellular バリアを rupture 壊する とが とが brightness ら になった になった になった.

项目成果

ボツリヌス神経毒素複合体の腸管上皮バリア通過機構

肉毒杆菌神经毒素复合物穿过肠上皮屏障的机制

• 发表时间: 2007
• 作者: 松村拓大;金 英姫;株本祐子;竹ケ原夕紀;菅原 庸;小熊惠二;藤永由佳子
• 通讯作者: 藤永由佳子

Mechanism of intestinal absorption of botulinum toxin.

肉毒杆菌毒素的肠道吸收机制。

• 发表时间: 2007
• 作者: 竹ケ原夕紀;金 英姫;松村拓大;菅原 庸;藤永由佳子;Y. Fujinaga
• 通讯作者: Y. Fujinaga

Disruption of the intestinal paracellular barrier by botulinum toxin complex.

肉毒杆菌毒素复合物破坏肠道细胞旁屏障。

• 发表时间: 2007
• 作者: T. Matsumura;Y. Jin;Y. Kabumoto;Y. Takegahara;Y Sugawara;K. Oguma;W. I. Lencer;and Y. Fujinaga
• 通讯作者: and Y. Fujinaga

ボツリヌス神経毒素複合体に含まれる無毒成分(HA)は腸管上皮細胞バケア機能を破壊する

肉毒杆菌神经毒素复合物中所含的无毒成分（HA）会破坏肠上皮细胞的烘焙功能。

• 发表时间: 2007
• 作者: 松村拓大;金 英姫;株本祐子;竹ケ原タ紀;菅原 庸;小態惠二;藤永由佳子
• 通讯作者: 藤永由佳子

The HA proteins of botulinum toxin disrupt intestinal epithelial intercellular junctions to increase toxin absorption

• DOI: 10.1111/j.1462-5822.2007.01048.x
• 发表时间: 2008-02-01
• 期刊: CELLULAR MICROBIOLOGY
• 影响因子: 3.4
• 作者: Matsumura, Takuhiro;Jin, Yingji;Fujinaga, Yukako
• 通讯作者: Fujinaga, Yukako