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RNAi依存的ヘテロクロマチンの制御因子としてのメディエーターの解析

RNAi 依赖性异染色质调节介质的分析

基本信息

批准号：
10J02107
负责人：
大屋恵梨子
金额：
$ 0.9万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2010
资助国家：
日本
起止时间：
2010 至 2011
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10J02107/
关键词：
RNAi non-coding RNA siRNA メディエーター転写ヘテロクロマチン RNAポリメラーゼII 分裂酵母

项目摘要

分裂酵母のセントロメア周縁部のヘテロクロマチンはRNAi(RNA interference)依存的に形成される。このヘテロクロマチン化とsiRNA(small interfering RNA)の生産はRNAポリメラーゼII(RNAPII)による転写と共役して起こると考えられている。そこで我々は、RNAPIIと相互作用する因子の中にRNAi経路で働くものがあると推測した。興味深いことに、メディエーター複合体のサブユニットPmc6をコードする遺伝子破壊株において、セントロメア周縁部のサイレンシングが脱抑制されることがわかった。メディエーターは、細胞内外の刺激やプロモーター特異的な環境をRNAPIIに伝える仲介因子として知られている。Δpmc6変異株では、セントロメア周縁部において、ヘテロクロマチンマークであるヒストンH3K9メチル化、およびSwi6(HP1ホモログ)の局在が減少していることがわかり、他のヘテロクロマチンには影響を及ぼさないことから、Pmc6はRNAi経路で機能することが示唆された。また、Δpmc6変異株はRNAi因子変異と同様に、細胞内にセントロメア周縁部ヘテロクロマチン領域由来のnon-coding RNA(ncRNA)を蓄積し、siRNAの合成不能が見られた。RNAi因子変異とΔpmc6との二重変異株を用いた更なる解析により、Pmc6はヘテロクロマチンにおけるncRNAの転写反応のみならず、その後のプロセシングにも関与していることが示唆された。さらに、メディエーターは、細胞周期依存的にRNAPIIと共にセントロメア周縁部ヘテロクロマチンに局在することが明らかになった。これらの結果は、メディエーターがRNAPIIと協調的に働き、セントロメア周縁部ヘテロクロマチンにおける転写と、RNAi経路での転写産物のプロセシングを共役する可能性を強く示唆している。

The formation of RNAi(RNA interference)-dependent DNA sequences in the cleavage yeast The production of siRNA(small interfering RNA) is the first step in the development of RNA-mediated RNA sequencing II(RNAPII). The interaction between RNA and RNA is predicted. The complex of Pmc6 and Pmc6 was developed by the author. The medium factor of RNAPII is the specific environment of the cell.Δpmc6 is a variant of the plant, which is responsible for reducing the impact of the plant on the environment, reducing the impact of the plant on the environment, and reducing the function of the plant on the environment. The RNAi factor of Δpmc6 is different from that of other plants, and the accumulation of non-coding RNA(ncRNA) in the cellular environment and the synthesis of siRNA cannot be observed. RNAi factors vary from Δ pmc6 to Δ pmc6, and from Δ pmc6 to Δ pmc6, and from Δ pmc6 to Δ pmc6. The cell cycle is dependent on RNAPII, which is the most important part of the cell cycle. The results of this study indicate that the possibility of a coordinated response between RNAi and RNAi is strong.