DNA複製機構の解明に向けた関連酵素Dna蛋白質の結晶構造解析

相关酶DNA蛋白的晶体结构分析，阐明DNA复制机制

• 批准号: 10J06066
• 负责人: 岡田 晃季
• 金额: $ 0.9万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2011
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10J06066/
• 关键词: 結晶構造解析; ヘリカーゼ; 構造解析; DAN転写; ヘソカーゼ

本研究において、大腸菌由来のDnaB-DnaC蛋白質のドメイン複合体結晶を得ることに成功した。さらにX線構造解析を行い、その楕造を明らかにした。また構造から活性に重要な残基が示峻された。DnaBのC末ドメインがDnaCのN末ドメインと結合している構造が解明され、これは本研究が初となる構造であった。この結果からDnaBが、どのようにDnaCと結合しているかが分子レベルで解明された。そこからDNA複製においてDnaBとDnaCがどのように機能しているかの知見が更に深まった。また、DnaB-DnaC蛋白質のドメイン構造は、活性体である6量体構造を保持しておらず、今回構造解析に使用したドメイン以外の部分において、6量体形成を促していることが明らかになった。しかし、今回の構造で解かれたDnaBのC末ドメインは他種由来のDnaBのC末ドメインと構造が類似していることから、DnaBのC末ドメインにおいては、今回の構造が実際の活性体でも保時される構造であると考えられた。また、本研究で解かれた結晶構造は大腸菌由来のヘリカーゼでは初の結晶構造であった。今までの機能解析の多くが大腸菌由来のヘリカーゼを用いて行われていたが、構造が未知であった。本研究でその結晶構造が解析されたことで、過去の機能解析についても構造的知見と照らし合わせることができると期待される。

In this study, DnaB-DnaC protein was isolated from E. coli, and the results of the complex were successful. On the basis of the X line, the analysis line is created, and the analysis line is made clear. The production of active and important residues shows that they are sensitive and sensitive. At the end of DnaB