フグ毒トランスポーターのクローニングと機能解析

河豚毒素转运蛋白的克隆及功能分析

• 批准号: 10J07110
• 负责人: 松本 拓也
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: Prefectural University of Hiroshima (2012)The University of Tokyo (2010-2011)
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2012
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10J07110/
• 关键词: テトロドトキシン; トランスポーター; DNAマイクロアレイ; 筋肉内投与; トラフグ; 遺伝子発現

前年度,研究代表者らは,養殖トラフグの肝臓および筋肉から作製したESTデータに対して,フグゲノムデータベースから抽出したトランスポーターをコードする推定cDNA配列を問い合わせ配列としてBLAST検索を行い,肝臓での発現が予測されるトランスポーターをコードする15遺伝子を選抜した。本年度は,RT-PCRで各組織における15遺伝子の発現分布を調べた。その結果,SLC38A5ならびにSLC25A48は卵巣と肝臓に発現が見られ,SLC23A2は肝臓,皮膚および消化管に強い発現が見られた。SLC22A16ならびにSLC16A6は肝臓および筋肉に,SLC48A1は肝臓,皮膚,卵巣および消化管に強い発現が見られ,SLC37A4は肝臓,卵巣および消化管に発現が認められ,そして,SLCO1C1は肝臓のみに発現が認められた。これら合計8遺伝子の全長cDNAをRACE法で決定し,全長cDNA配列から推定されるトラフグ肝臓トランスポーター遺伝子の演繹アミノ酸配列をヒト,ラット,ニワトリ,アフリカツメガエル,ティラピア,ゼブラフィッシュおよびミドリフグのトランスポータータンパク質と比較した。中性アミノ酸輸送体であるSLC38A5,ビタミンC輸送体であるSLC32A2,ヘム輸送体であるSLC48A1およびグルコース-6-リン酸を輸送するSLC37A4の基本的な基質を輸送する4つのトランスポーターは,様々な動物種間で高いアミノ酸同一率を示した。一方,興味深いことに,有機カチオンを輸送するSLC22Al6は魚類の間で比較的高いアミノ酸同一率を示し,有機イオンを輸送するSLCO1C1はフグ類で高いアミノ酸同一率を示した。

Year before, the representatives ら は, breeding ト ラ フ グ の is crucial liver お よ び brawn か ら cropping し た EST デ ー タ に し seaborne て, フ グ ゲ ノ ム デ ー タ ベ ー ス か ら spare し た ト ラ ン ス ポ ー タ ー を コ ー ド す る presumption of cDNA match column を asked い close わ せ match column と し て BLAST 検 cable line を い, a routine liver で の 発 が now be さ れ る ト ラ ン ス Youdaoplaceholder0 ポ タ をコ をコ ドする ドする15 伝 selected を た た. In this year, 伝,RT-PCRで, the distribution of における offspring of における15 in each tissue を pattern べた. そ の results, SLC38A5 な ら び に SLC25A48 は eggs 巣 と routine liver に 発 が now see ら れ, SLC23A2 は is crucial to the liver, skin お よ び digestive tube に strong い 発 が now see ら れ た. Crucial SLC22A16 な ら び に SLC16A6 は liver お よ び brawn に, SLC48A1 は routine liver, skin, egg 巣 お よ び digestive tube に strong い 発 が now see ら れ, SLC37A4 は routine liver, egg 巣 お よ び digestive tube に 発 が now recognize め ら れ, そ し て, SLCO1C1 は routine liver の み に 発 が now recognize め ら れ た. こ れ ら total 8 heritage 伝 son の length cDNA を で decided し RACE method, full length cDNA match column か ら presumption さ れ る ト ラ フ グ routine liver ト ラ ン ス ポ ー タ ー posthumous son 伝 の deduce ア ミ ノ acid with column を ヒ ト, ラ ッ ト, ニ ワ ト リ, ア フ リ カ ツ メ ガ エ ル, テ ィ ラ ピ ア, ゼ ブ ラ フ ィ ッ シ ュ お よ び ミ ド リ フ グ の ト ラ ン ス ポ ー Youdaoplaceholder0 タ タ タ パ パ パ the comparison of succilla と た. Neutral ア ミ ノ acid conveying body で あ る SLC38A5, ビ タ ミ ン C conveying body で あ る SLC32A2, ヘ ム conveying body で あ る SLC48A1 お よ び グ ル コ ー ス - 6 - リ ン acid を conveying す る SLC37A4 の basic な matrix を conveying す る 4 つ の ト ラ ン ス ポ ー タ ー は, others 々 な animal interspecies で high い ア ミ ノ acid with A rate of を indicates that た. Deep side, tumblers い こ と に, organic カ チ オ ン を conveying す る SLC22Al6 は fish の で comparison between high い ア ミ ノ acid を し, at the same rate of organic イ オ ン を conveying す る SLCO1C1 は フ グ high class で い ア ミ ノ を acid at the same rate in し た.

项目成果

トラフグ肝臓トランスポーターslc44a1を安定発現させたHEK293細胞によるテトロドトキシンの取り込み

稳定表达虎河豚肝转运蛋白 slc44a1 的 HEK293 细胞对河鲀毒素的摄取

• 发表时间: 2011
• 作者: 松本拓也;Feroudj H;菊地遼輔;長島裕二;金子元;潮秀樹;児玉正昭;渡部終五
• 通讯作者: 渡部終五

水産学シリーズ第174号「フグ研究とトラフグ生産技術の最前線」

水产科学系列第174期《河豚鱼研究前沿及虎河豚生产技术》

• 发表时间: 2012
• 作者: Takuya Matsumoto;Daisuke Tanuma;Kazuma Tsutsumi;Shoichiro Ishizaki;Shugo Watahe;Yuji Nagashima;松本拓也
• 通讯作者: 松本拓也

Differential gene expression profile in the liver of the marine puffer fish Takifugu rubripes induced by intramuscular administration of tetrodotoxin

• DOI: 10.1016/j.toxicon.2010.12.007
• 发表时间: 2011-02-01
• 期刊: TOXICON
• 影响因子: 2.8
• 作者: Matsumoto, Takuya;Ishizaki, Shoichiro;Nagashima, Yuji
• 通讯作者: Nagashima, Yuji

Plasma protein binding of tetrodotoxin in the marine puffer fish Takifugu rubripes

• DOI: 10.1016/j.toxicon.2009.09.006
• 发表时间: 2010-02-01
• 期刊: TOXICON
• 影响因子: 2.8
• 作者: Matsumoto, Takuya;Tanuma, Daisuke;Nagashima, Yuji
• 通讯作者: Nagashima, Yuji

Tetrodotoxin Poisoning Due to Smooth-backed Blowfish <i>Lagocephalus inermis</i> and Toxicity of <i>L. inermis</i> Caught off the Kyushu Coast, Japan

光滑背河豚<i>Lagocephalus inermis</i>引起的河豚毒素中毒及<i>Lagocephalus inermis</i>的毒性。

• DOI: 10.3358/shokueishi.53.85
• 发表时间: 2012
• 期刊: Food Hygiene and Safety Science (Shokuhin Eiseigaku Zasshi)
• 作者: Masatoshi Katabuchi;Hiroko Kurokawa;Stuart J.Davies;Sylvester Tan;Tohru Nakashizuka;片渕正紀;片渕正紀;片渕正紀;片渕正紀;Yuji Nagashima
• 通讯作者: Yuji Nagashima