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肺腺癌のリネジ特異的生存因子であるTTF-1遺伝子の下流分子の探索と機能解明

TTF-1基因下游分子的发现和功能阐明，TTF-1基因是肺腺癌谱系特异性生存因子

基本信息

批准号：
10J07945
负责人：
細野祥之
金额：
$ 0.45万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2010
资助国家：
日本
起止时间：
2010 至 2011
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10J07945/
关键词：
肺腺癌転移・浸潤アクチン細胞骨格

项目摘要

正常末梢肺上皮細胞株にTTF-1を導入し、マイクロアレイ法による網羅的遺伝子発現解析を行い、TTF-1導入細胞株において著明な発現誘導を示すTTF-1の標的遺伝子としてMYBPH (myosin binding protein H)を同定した。TTF-1によるMYBPHの発現調節が転写レベルで行われていることを、ルシフェラーゼアッセイ法とクロマチン免疫沈降法により確認した。MYBPH導入細胞株では細胞遊走能・浸潤能が抑制され、また高転移性肺癌細胞株の肺転移能の抑制が観察された。また、MYBPH高発現を示す肺腺癌臨床検体では病理学的に浸潤性が低かりた。さらに、MYBPH導入細胞株ではアクチン・ミオシンの配交が乱れ、アクチンストレスファイバーの形成阻害を認めた。生化学的な機能解析を進めた結果、MYBPHがROCK1と結合してmyosin light chainのリン酸化を抑制すること及び、myosin heavy chainとも結合し、その会合を阻害することが明らかとなった。興味深いことに、一部のTTF-1陽性の肺癌細胞株と肺腺癌臨床検体において、MYBPHはプロモーター領域のDNAメチル化による発現抑制をうけていた。本研究により、TTF-1の発現が肺腺癌の生存に必須であるにも関わらず、なぜTTF-1を発現している肺腺癌は臨床的予後がいいのかという疑問に対して、TTF-1によって誘導されるMYBPHというこれまでほとんど機能未解明であった分子が、その原因の一端を担っている可能性が強く示唆された。また、肺腺癌の進展にとって不利に働くと考えられるMYBPHの発現は、そのプロモーター領域のDNAメチル化によって抑制されていることが明らかとなった。

The analysis of gene expression in normal peripheral lung epithelial cell lines induced by TTF-1 introduction and MAIKULORAI method has been carried out. The target gene of TTF-1, MYBPH (myosin binding protein H), has been identified as the target gene of TTF-1. TTF-1 is regulated by MYBPH and confirmed by immunoprecipitation. MYBPH introduced cell lines inhibited cell migration and infiltration, and the inhibition of lung migration in highly metastatic lung cancer cell lines was observed. The high incidence of MYBPH indicates that the clinical manifestations of lung adenocarcinoma are low in invasiveness. In addition, MYBPH introduced into the cell line is able to detect the formation of inhibition factors by cross-fertilization and cross-fertilization. Biochemistry function analysis results, myosin heavy chain binding inhibition, myosin heavy chain binding inhibition, myosin heavy chain binding inhibition In addition, a number of TTF-1 positive lung cancer cell lines and lung adenocarcinoma clinical models were detected, and MYBPH was found to be inhibited in the field of DNA fragmentation. In this study, TTF-1 expression is essential for survival of lung adenocarcinoma, and TTF-1 expression is suspected to be clinically related to lung adenocarcinoma. TTF-1 expression is induced by MYBPH, and its function is not yet understood. The development of lung adenocarcinoma is closely related to the development of MYBPH, and the development of DNA in the lung adenocarcinoma is closely related to the development of lung adenocarcinoma.