放射線による腸死に対する治療法としての幹細胞移植の可能性の探索

探索干细胞移植治疗辐射引起的肠道死亡的潜力

• 批准号: 21659282
• 负责人: 小野 哲也
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Exploratory Research
• 财政年份: 2009
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2009 至 2010
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21659282/
• 关键词: 放射線; 腸死; 小腸; 幹細胞; 移植; マウス

放射線による腸死に対し幹細胞移植による治療の可能性を探るためマウスを用いたモデル実験を行うのが目的である。昨年の結果から胎仔期の小腸上皮細胞を用いれば幹細胞移植がより効率的に行える可能性が示唆されたので、本年度はまず小腸上皮細胞をsingle cellとしてより多く回収する方法を検討した。具体的には細胞が緑の蛍光を発するように改変されたEGFPマウスの17.5～18.5日齢胎仔小腸を用い、文献情報から得られたコラゲナーゼ、ヒアルロニダーゼ、パンクレアチン、トリプシン、DNase I、EDTAの単独及びそれらの2つ以上の組み合わせた処理について検討した。また処理方法は0℃×60分、20℃×20分、37℃×20分についてチェックした。指標としてはsingle cell suspensionが得られるか、蛍光蛋白が細胞内によく保持されているか、細胞の収率はよいかの3点で行った。その結果、EDTA存在下でヒアルロニダーゼを37℃×20分処理後トリプシン+DNase Iを20℃×20分を行うのが最適であることが分かった。この時の細胞の回収率は0.3～1×10^5 cells/マウスであった。次にこの細胞を用い10Gy照射したマウスの尾静脈に投与した結果、マウスの生存期間は9～11日であった。これは何も処理しない時の生存期間とほぼ同じであり、生存率への影響はみられなかった。このとき小腸にはかなりの数の移植された蛍光細胞がみられたが、幹細胞から絨毛上皮に向けた直線状の細胞のつながりは見えなかったので、幹細胞をうまく移植できたかどうかは不明である。個体の腸死を回復させるためには今後さらなる検討が必要である。

Radiation therapy for stem cell transplantation is an important part of the process. Last year's results showed the possibility of using fetal small intestinal epithelial cells for stem cell transplantation, and this year's results showed that small intestinal epithelial cells could be used for single cell transplantation. Specific changes to EGFP were made in the 17.5 - 18.5 day fetal small intestine. Literature information was obtained from the study of EGFP, EGFP, The treatment method is 0℃×60 minutes, 20℃×20 minutes, 37℃×20 minutes. The index of single cell suspension was obtained, and the protein of light was maintained in the cell. The rate of cell suspension was increased by 3 points. The results showed that in the presence of EDTA, the optimum temperature was 37℃×20 min after treatment with DNase I at 20℃×20 min. The recovery rate of the cells was 0.3~1×10^5 cells/day. The cells were irradiated with 10Gy and the survival time was 9~11 days. How to deal with the survival period of the same, survival rate of the impact of the same The number of stem cells transplanted into the small intestine is unknown. The number of stem cells transplanted into the small intestine is unknown. The individual's death is necessary for the future