Observation of single transport events through single pore complexes of the nuclear envelope by means of near-field optical microscopy

通过近场光学显微镜观察通过核膜单孔复合体的单一运输事件

• 批准号: 5391801
• 负责人: Privatdozent Dr. Andreas Naber
• 金额: --
• 依托单位: Institut für Angewandte Physik (APH)
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Priority Programmes
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2002-12-31 至 2009-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5391801?language=en
• 关键词: Observation; single; transport; events; through

Die nukleären Porenkomplexe (NPCs) sind supramolekulare Einheiten, die in die Doppelmembran der Kernhülle einer eukaryontischen Zelle eingebettet sind. Sie sind die Hauptpforte für den Transport von Ionen, kleinen Molekülen, Proteinen, RNAs und Ribonukleoproteinpartikeln in und aus dem Zellkern. Ziel dieses Projektes ist es, zu der Aufklärung der Struktur und den Transportmechanismen des NPC mittels direkter Beobachtung einzelner Transportereignisse durch einzelne NPCs beizutragen. Die hohe laterale und axiale optische Auflösung eines optischen Rasternahfeldmikroskops (SNOM) ermöglicht einen detaillierten Einblick in die Transportdynamik eines NPC, der mit anderen mikroskopischen Methoden z.Z. kaum erreichbar ist. Für zeitaufgelöste Messungen einzelner Transportereignisse soll die 30-100 nm große Lichtquelle eines SNOM im Abstand weniger Nanometer über einen einzelnen NPC in einer freistehenden Kernhülle positioniert werden. Einzelne Moleküle, die mit einer fluoreszierenden Sonde markiert wurden, leuchten auf sobald sie den beleuchteten zentralen Transportkanal durchqueren. Die hohe zeitliche Auflösung in Verbindung mit der ultra-hohen optischen Auflösung in Richtung des Transportkanals ist ideal geeignet für die Bestimmung der Dynamik eines Transportprozesses, wie etwa positioneller Schritte während der Translokation. Die axiale Auflösung soll es auch erlauben, die Mobilität einzelner fluoreszenzmarkierter Proteine des Kernporenkomplexes innerhalb seiner sehr beweglichen Struktur zu messen.

核子实体(NPC)死于真核生物的核膜和核心层。Sind Sind Hauptpforte für den Transport von Ionen，Kleinen Molekülen，Proteinen，RNAs and RibonukleoProtekeln in und Aus Dm Zellkern.他说：“这是一项重大的工程，也是一项重要的工作。”从侧面到轴向，从侧面到轴向，再加上交通运输方面的详细信息，MIT和mikroskischen Methoden z.Z.Kaum erreichbar都有。Für zeitaufelöste Messungen einzelner Transportereignisse soll die 30-100 nm groüe e lichtquelle eines SNOM in Abstand Weiger Nanoüber einen einzelnen NPC in einer freistehenden kernhülle Positioniert.Einzelne Moleküle，De MIT einer，Sonde markiert Wurden，Leuchten auf sof sod sie den Beleuchteten zentalen Transport kanal duchquen.交通运输的理想技术是运输的理想技术，交通运输的定位是Schritte während der Translokation。他说：“这是一件很重要的事情，因为这是一件很重要的事情。