Struktur und Funktion eukaryontischer N-Methylpeptidsynthetasen: Molekulare Charakterisierung katalytischer Zentren des Multienzyms Enniatin-Synthetase und verwandter Systeme

真核 N-甲基肽合成酶的结构和功能：多酶恩尼亚酸合成酶及相关系统催化中心的分子表征

• 批准号: 5392659
• 负责人: Privatdozent Dr. Rainer Zocher
• 金额: --
• 依托单位: Arbeitsgruppe Physikalische Chemie/ Biophysikalische Chemie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 1996-12-31 至 2002-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5392659?language=en
• 关键词: Struktur; und; Funktion; eukaryontischer; Methylpeptidsynthetasen

Die Arbeiten an der Expression der gesamten, katalytisch aktiven Enniatin Synthetase (ESYN) sowie von Fragmenten des Multienzyms in Streptomyces sollen abgeschlossen werden. Sie bilden die Grundlage für die Herstellung neuer Hybridsynthetasen sowie Varianten der ESYN, die zur Struktur-Funktionsanalyse und zur Herstellung neuer Cyclopeptide verwendet werden. Außerdem sollen verschiedene Deletionsvarianten, z.B. in der Methylase bzw. der Spacerregion zwischen den Aktivierungsdomänen exprimiert, und der Einfluß der Deletionen auf die Enzymaktität untersucht werden. Weiter ist geplant, die AdoHcy-Bindungsstelle zu lokalisieren und entsprechende Mutationen in diesem Bereich zu erzeugen. Die Kristallisationsexperimente zur Ermittlung der Raumstruktur der ESYN sollen fortgesetzt werden. Diese Untersuchungen werden ergänzt durch elektronenmikroskopische Studien, bei denen Komplexe mit monoklonalen Antikörpern weitere Erkenntnisse über die Anordnung der Reaktionszentren ergeben sollen. Das Molgewicht der nativen ESYN soll durch analytische Ultrazentrifugation ermittelt werden um festzustellen, ob das native Enzym als Monomer oder Oligomer (Trimer) vorliegt.

苏氏链霉菌中gesyatin合成酶（ESYN）的表达、催化活性及多酶片段性研究。4 . Herstellung - neder杂交合成技术，结构函数分析和Herstellung - neer环肽verwendet werden。在甲基化酶bzw中，he ß ße ß ß sollen verschiedene deletionsvariant, z.b。der Spacerregion zwischen den Aktivierungsdomänen expriert, and der influß der Deletionen auf die Enzymaktität untersucht werden。[2] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [3]晶体化实验研究：在高温下的高温高温下的高温高温。中国科学院电子显微研究中心，中国科学院电子显微研究中心Antikörpern中国科学院电子显微研究中心，中国科学院电子显微研究中心，中国科学院电子显微研究中心。采用超离心法对天然酶单聚物（三聚体）进行分析。