ヒラメリンホシスチス病耐性系統を用いた病態生理学的研究

使用 Hiramelophocystis 抗病菌株进行病理生理学研究

• 批准号: 22780175
• 负责人: 藤 加菜子
• 金额: $ 2.08万
• 依托单位: Tokyo University of Marine Science and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2011
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22780175/
• 关键词: 海洋科学; 魚病

申請者らがこれまでの研究で開発したリンホシスチス病(LD)耐性ヒラメは、ウイルス病の一種であるLDに抵抗性を示す系統であり、このヒラメは全国のヒラメ養殖場におけるLD被害の軽減に貢献している。しかし、他のヒラメがLDを発症している状況下においてLD耐性ヒラメがなぜ、LDを発症しないのか分かっていない。そこで、LD耐性ヒラメと通常養殖ヒラメを用いて人為感染試験を行い、各系統の感染後の生体反応の違いに着目して、LDに対する防御機序を明らかにすることを目的として本課題を遂行している。1.LD耐性ヒラメ(感染(RV)区、非感染(RC)区)と通常養殖ヒラメ(感染(SV)区、非感染(SC)区)の感染試験を行った。感染区の感染には、リンホ細胞を磨砕して作成したウイルス液を使用した。ウイルス液に試験個体を6時間浸漬した後、通常飼育水へ移しリンホ細胞の形成を観察しながら飼育した。感染後、0,1,3,7,14,21日後に各区5尾ずつをサンプリングした。各個体の腎臓を実験2に用い、血清を実験3に用いた。2.今年度は、ヒラメ連鎖地図上の位置情報から、LD耐性遺伝子座近傍に位置すると推定される免疫関連遺伝子である、ヒラメMHCIIaとTLR2の遺伝子配列を元にprimerを作成し、それらの発現解析を行った。採取した各サンプルの腎臓から抽出したRNAを用いてリアルタイムPCRを行った結果、感染0日目において、TLR2はS区でR区より発現量が有意に多く、MHCIIaはR区でS区より発現量が有意に多かった。その後、R区0日目、S区0日目を基準にしてそれぞれの区の発現量を比較したが、経過時間と発現量の変化に関連は見られなかった。3.各サンプル個体から採取した血清を用い、ELISA法による抗体価の測定を行ったが、R区、S区共に有意な差は見られなかった。

Applicant's らがこれまでの Research で开発たリンホシスチス Disease (LD) Resistance ヒラメは, ウイルス Disease の一であるL DにResistance を Show す system であり, このヒラメはNational のヒラメbreeding farm におけるLD was killed の軽reduce にcontribution している.しかし、他のヒラメがLDを発 syndrome している Condition においてL D resistance resistance, LD resistance, disease resistance, resistance to disease.そこで, LD resistant ヒラメとNormally cultured ヒラメを is used for artificial infection test, and the biological reaction after infection in each systemのviolation of the purpose of the project, LD of the defense machine sequence of the program and the purpose of the project. 1. Infection test of LD resistant ヒラメ (infected (RV) area, non-infected (RC) area) and normal cultured ヒラメ (infected (SV) area, non-infected (SC) area). In the infected area, the infected area is infected, and the したウイルス Liquid is prepared and used. After immersing the test specimens in the ウイルス liquid test sample for 6 hours, the normal breeding water was transferred into the しリンホ cells to form a を観Observation しながらraised した. After infection, 0, 1, 3, 7, 14, and 21 days later, there will be 5 tails in each district. Each individual's kidney function is 2 and the serum is 3. 2. This year’s は, ヒラメ chain on the ground location information から, LD endurance tester near the location of the holder and presumed immune-related testerである、ヒラメMHCIIaとTLR2の伝子综合を元にprimerを成し、それらの発行った. The results of the RNA extraction and PCR PCR were carried out, and the result of infection was 0 days.て, TLR2 has a lot of interest in S area and R area, and MHCIIa has a lot of interest in R area.その后, R area 0 day item, S area 0 day item を standard にしてそれぞれの区の発appear Quantity means comparison, time passes, and quantity changes. The relationship is related. 3. The individual serum of each individual was collected and used, and the antibody test was measured using ELISA, and the R and S areas were divided into two groups.