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魚病細菌Listonella anguillaraのプロテイナーゼの新しい機能

鱼病细菌鳗鱼利斯顿氏菌蛋白酶的新功能

基本信息

批准号：
06806022
负责人：
鈴木聡
金额：
$ 0.96万
依托单位：
Kochi University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06806022/
关键词：
Fish Pathogen Listonella anguillara Metallo protease Substrate specificity Anticoagulation Activated protein C

项目摘要

魚病細菌Listonella anguillaraの病原性決定因子の一つに細胞外プロテアーゼがある。しかし、これまではどのようなプロテアーゼが産生され、それらがどのような生理機能を担っているのかについてはほとんど報告がなかった。本研究では、本菌のプロテアーゼが宿主の炎症反応誘発に関わっているのではないか、という仮説のもとに、酵素の気質特異性からその機能を明らかにすることを目的に研究を行った。まず本菌の多数の株についてプロテアーゼ産生プロフィールを基質特異性に基づいて調べたところ、複数のプロテアーゼが産生されていた。そのうち、多くの菌が産生したBoc-LSTR-MCA水解酵素に焦点をあてた。この酵素を精製したところ、メタロプロテアーゼであり、既報ではあるが、機能については不明の酵素であると考えられた。本研究ではこのメタロプロテアーゼの機能を解析した。本酵素が選択的に水解する基質Boc-LSTR-MCAは抗凝血因子の一つactivated protein Cの基質であることから、本酵素が同様の作用を持つことが示唆された。抗凝血反応系に関与するプロテアーゼ群用の基質を用いてアッセイしたところ、本プロテアーゼはactivated protein Cと同様の作用でFactor Vを不活性化することが明らかになった。その結果、Factor VaはFactor Xaとコンプレックスを作ってプロトロンビンをトロンビンへ変換する触媒機能が低下する。そして最終的に血液凝固反応が起きにくくなったと考えられた。本研究では、さらに、ニジマスを使ったin vivoと、MCA基質を使ったin vitroの実験から、本酵素はハ-ゲマン因子の様な働きをして血管の透過性を上げることもわかった。このように、本研究ではL.anguillaraのプロテアーゼの新しい生理機能を解明することができた。現在2、3報目を論文に作成中である。

The pathogenicity determinant of fish disease bacteria Listonella anguillara The function of production is to report to the public. The aim of this study is to clarify the role of the enzyme in response to inflammation in the host. Most of the strains in this strain produce a substrate specific protein, and a plurality of proteins produce a protein. Boc-LSTR-MCA hydrolysis enzyme focus The enzyme is refined, the function is unknown This paper analyzes the function of the software. This enzyme is responsible for the hydrolysis of the substrate Boc-LSTR-MCA, which is a substrate for activated protein C of anticoagulant factor. Anticoagulant system is related to the activation of Factor V in the matrix used by the group. As a result, Factor Va and Factor Xa have been found to have low catalytic activity. The final blood coagulation reaction starts. In this study, the enzyme was used in vivo and in vitro. This study is aimed at clarifying the physiological functions of L.anguillara. Now 2 or 3 papers are made.