熱帯熱マラリア原虫を伝播しないトランスジェニックハマダラカの作製

培育不传播恶性疟原虫的转基因按蚊

• 批准号: 22790398
• 负责人: 笠嶋 めぐみ
• 金额: $ 1.91万
• 依托单位: Jichi Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2010
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2010 至 2011
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22790398/
• 关键词: 昆虫; 感染症; 遺伝子

ヒトマラリアである熱帯熱マラリア原虫(Plasmodium falciparum,Pf)のCSPは、肝臓への侵入に必須なタンパク質である。CSPを認識する2A10mAbは、原虫の肝臓への侵入をブロックし、感染を阻止できることが明らかな唯一のエフェクター分子である。本研究では、マラリアを媒介しない組換え蚊の作製を目的として、2A10mAbの一本鎖抗体(scFv)を発現する組換え蚊を作製し、伝播阻止能力を検証した。また、本研究ではマウスを用いてヒトに対する効果を評価できるように、マラリア感染実験にはマウスマラリア原虫(P.berghei,Pb)の内在性のPbCSPをPfCSPに置換した組換えマウスマラリア原虫(PfCSP/Pb)を用いた。はじめに、2A10mAbをもとにscFvを構築し、組換えscFvタンパク質を合成した。組換えscFvタンパク質は2A10mAbと同様にPfCSPに対して高い特異性を持っていた。さらに、HepG2細胞を用いたin virto感染実験における組換えscFvタンパク質の侵入阻害率は95%であった。これは、2A10mAbと同等の高い効果であった。そこで、scFv遺伝子をゲノム中に組込んだ組換え蚊を作出した。この組換え蚊が発現するDsRed融合scFvタンパク質もPfCSPを標的として認識できることを確かめた。最後に、この組換え蚊がマラリアを媒介するか調べた。PfCSP/Pb原虫感染組換え蚊に吸血された正常マウスがマラリアに感染するかどうか調べたところ(バイティングチャレンジ)、野生型蚊のコントロールではマラリア感染率が83.3%だったのに対して、組換え蚊では25%と有意に感染率が低かった。本研究では、熱帯熱マラリアの伝播を約7割ブロックできる組換え蚊を作出することに成功した。

ヒ ト マ ラ リ ア で あ る 帯 hot マ ラ リ ア parasite, Plasmodium falciparum, Pf) の CSP は routine, liver へ の intrusion に must な タ ン パ ク qualitative で あ る. CSP を know す る 2 a10mab は, protozoon の is crucial liver へ の intrusion を ブ ロ ッ ク し, infection を stop で き る こ と が Ming ら か な only の エ フ ェ ク タ ー molecular で あ る. This study で は, マ ラ リ ア を medium し な い group in え mosquito の cropping を purpose と し て, 2 a10mab の antibody (scFv) a lock を 発 now す る group in え mosquito を cropping し, ability to prevent を 伝 検 card し た. ま た, this study で は マ ウ ス を with い て ヒ ト に す seaborne る unseen fruit を review 価 で き る よ う に, マ ラ リ ア infection be 験 に は マ ウ ス マ ラ リ ア parasite (P.b erghei, Pb) の internality の PbCSP を PfCSP に replacement し た group in え マ ウ ス マ ラ リ ア parasite (PfCSP/Pb) を い た. は じ め に, 2 a10mab を も と に scFv を build し, group in え scFv タ ン パ ク qualitative を synthetic し た. Group in え scFv タ ン パ ク は (2 a10mab と with others に PfCSP に し seaborne high い specificity を hold っ て て い た. さ ら に, HepG2 cells を い た in virto infection be 験 に お け る group in え scFv タ ン パ ク qualitative の intrusion resistance against は 95% で あ っ た. Youdaoplaceholder2 れ と and 2A10mAbと have the same <s:1> high れ effect であった. そ こ で, scFv but 伝 を ゲ ノ ム に group 込 ん だ group in え mosquito を make し た. こ の group in え mosquito が 発 now す る DsRed fusion scFv タ ン パ ク qualitative も PfCSP を mark と し て know で き る こ と を か indeed め た. Finally, the に and <s:1> are replaced by the え mosquito が and the ラリアを vector する and べた. PfCSP/Pb in infection group え mosquito sucking blood に さ れ た normal マ ウ ス が マ ラ リ ア に infection す る か ど う か adjustable べ た と こ ろ (バ イ テ ィ ン グ チ ャ レ ン ジ), wild type mosquito の コ ン ト ロ ー ル で は マ ラ リ ア infection rate 83.3% が だ っ た の に し seaborne て, group in え mosquito で は 25% と intentionally に low infection rate が か っ た. This study で は, 帯 hot マ ラ リ ア の 伝 sowing を about 7 cut ブ ロ ッ ク で き る group in え mosquito を make す る こ と に successful し た.

项目成果

Biochemical properties of Caenorhabditis elegans HMG-5, a regulator of mitochondrial DNA.

• DOI: 10.1093/jb/mvr008
• 发表时间: 2011-05
• 期刊: Journal of biochemistry
• 影响因子: 2.7
• 作者: M. Sumitani;K. Kasashima;J. Matsugi;H. Endo

抗CSP抗体を唾液腺で発現する遺伝子組換えハマダラカ～マラリア非媒介蚊の作製を目指して～

转基因按蚊，在其唾液腺中表达抗 CSP 抗体 - 旨在创造一种非疟疾媒介蚊子 -

• 发表时间: 2010
• 作者: 島田厚良;石井さなえ;炭谷めぐみ
• 通讯作者: 炭谷めぐみ

熱帯熱マラリア原虫を媒介しないトランスジェニックハマダラカの作製

培育不传播恶性疟原虫的转基因按蚊

• 发表时间: 2010
• 作者: Hoshino S.;Kurishima A.;Inaba M.;Ando Y.;Fukui T.;Uchida K.;Nishio A.;Iwai H.;Yokoi T.;Ito T.;Hasegawa-Ishii S.;Shimada A.;M. Li;K. Okazaki;S. Ikehara;炭谷めぐみ
• 通讯作者: 炭谷めぐみ