新たな動物モデルを用いた難治性感染症とがんに対する革新的免疫遺伝子治療

使用新动物模型治疗难治性感染和癌症的创新免疫基因疗法

基本信息

批准号：
19659254
负责人：
安川正貴
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Ehime University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2007
资助国家：
日本
起止时间：
2007 至 2008
项目状态：
已结题

项目摘要

最近、免疫細胞を用いたがんならびに難治性感染症に対する養子免疫療法が注目されている。抗原特異的養子免疫療法における最大の課題は、high affinityのT細胞レセプター(TCR)を発現しているCTLを大量に誘導することである。我々は、すでに樹立したがん関連抗原由来ベプチド特異的CTLクローンからTCR遺云子を単離し、その発現レンチウイルスベクターおよびレトロウイルスベクターを構築した。さらに、末梢血リンパ球ならびに造血幹細胞に遺伝子導入し、TCR発現細胞機能を解析した。健常人末梢血CD4およびCD8陽性T細胞にTCR遺伝子導入したところ、効率よく遺伝子導入したTCRの発現が確認された。TCR遺伝子導入CD8陽性T細胞はもとのCTLクローン同様に、HLA拘束性に腫瘍細胞に対して細胞傷害性を示したが、正常細胞には全く影響を与えなかった。他方、このTCR遺伝子を臍帯血CD34陽性造血幹細胞に遺伝子導入した後、新たな免疫不全マウスであるNOD/SCID/commonγ^<rull>マウスに移植した。約3ヶ月後に遺伝子導入したTCRを発現するヒトT細胞が分化、増殖することが確認された。これらのT細胞は、ペプチド刺激時異的にIFN-γを産生したことから、機能的にもペプチド特異牲を有していることが確認された。これらの結果は、がんならびにウイルス特異的CTL由来TCR遺伝子導入による新たな治療法開発が可能であることを示すものである。現在さらに、ヒトサイトメガロウイルスならびにEBウイルス特異的CTLクローンを樹立し、それらからTCR遺伝子をクローニングし、そのベクターの構築を行っている。

最近，使用免疫细胞的癌症和难治感染的继发性免疫疗法引起了人们的关注。抗原特异性收养免疫疗法中最大的挑战是诱导大量表达高亲和力T细胞受体（TCR）的CTL。我们从源自癌症相关抗原的Veptide特异性CTL克隆中分离了TCR病变，并构建了其表达的慢病毒和逆转录病毒载体。此外，将基因转移到外周血淋巴细胞和造血干细胞中，并分析了表达TCR的细胞功能。当将TCR基因转移到健康个体的外周血CD4和CD8阳性T细胞中时，通过基因转移有效地证实了TCR的表达。 TCR转基因CD8阳性T细胞与原始CTL克隆一样，对肿瘤细胞显示出HLA限制的细胞毒性，但对正常细胞没有影响。另一方面，将该TCR基因转染到脐带血CD34阳性造血干细胞中，然后将其移植到新的免疫缺陷小鼠中，点头/scid/scid/commonγ^<rull>小鼠。已经证实，大约3个月后表达转基因TCR的人T细胞分化和增殖。这些T细胞在肽刺激后会差异地产生IFN-γ，因此被证实具有功能性肽特异性。这些结果证明了通过癌症和病毒特异性CTL衍生的TCR基因转移开发新疗法的可能性。当前，已经建立了人类巨细胞病毒和EB病毒特异性CTL克隆，从中克隆了TCR基因，并构建了矢量。

项目成果

期刊论文数量（37）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Zinc finger protein 521/early heraatopoietic zinc finger protein の赤血球分化における役割

锌指蛋白521/早期造血锌指蛋白在红系分化中的作用

DOI：
发表时间：
2008
期刊：
影响因子：
0
作者：
松原悦子;安川正貴;他
通讯作者：
他

Identification of a novel epitope derived from CML66 which is recognized by anti-leukaemia cytotoxic T lymphocytes

鉴定源自 CML66 的新表位，该表位可被抗白血病细胞毒性 T 淋巴细胞识别

DOI：
发表时间：
期刊：
British Journal of Haematology (in press)
影响因子：
0
作者：
Suemori K;Fujiwara H;Ochi T;Azuma T;Yamanouchi J;Narumi H;Yakushijin Y;Hato T;Yasukawa M.
通讯作者：
Yasukawa M.

腫瘍関連抗原CML66の臨床的有用性

肿瘤相关抗原CML66的临床应用